调脾合剂的定性定量分析
来源：岁月联盟
时间：2010-07-12
【关键词】 调脾合剂 薄层色谱法 高效液相色谱法 橙皮苷
调脾合剂是我院临床经验方，主要由陈皮、山楂、苍术、佩兰、鸡内金等组成，具有燥湿健脾、理气和胃的功效。用于运化失司所致的腕腹胀满，消化不良，食欲不振，口干甜腻，恶心呕口等厌食症。经我院的三十多年使用，疗效颇佳。为了对调脾合剂进行质量控制，我们采用薄层色谱法对调脾合剂中陈皮和山楂进行定性鉴别；以橙皮苷为指标成分，采用高效液相色谱法对其进行定量分析。现报道如下。
1 实验材料
1.1 试药
调脾合剂，由江苏省中制剂部提供。橙皮苷，薄层层析硅胶G（60型）。甲醇为色谱醇；其它试剂均为分析纯。
1.2 仪器
WUFENG高效液相色谱仪；HypersilC18柱（4.6mm×250mm,5μm）。BP211D十万分之一分析天平；939型全自动薄层置板器。
2 定性定量分析
2.1薄层色谱鉴别
2.1.1陈皮的薄层色谱鉴别
取调脾合剂20ml，加甲醇20ml,超声20min,滤过，取滤液5ml,水浴蒸干,残渣用1ml甲醇溶解作为供试品溶液。同法制备陈皮缺味阴性对照溶液。取陈皮对照药材2g,同法制备陈皮对照药材溶液。照薄层色谱法（2005版药典附录ⅥB）实验。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.1.2山楂的薄层色谱鉴别
取合剂20ml,用乙酸乙酯萃取3次，每次10ml,合并萃取液，水浴蒸干，用1ml乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液。同法制成山楂缺味阴性对照溶液。另取山楂对照药材1g,同法制成山楂对照药材溶液。照薄层色谱法（2005版中国药典附录ⅥB）实验，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。
2.2含量测定
2.2.1 色谱条件
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-醋酸-水（35∶4∶61）为流动相；检测波长为283nm。理论塔板数按橙皮苷峰应不低于4000。
2.2.2 对照品溶液的制备及线性关系的考察
精密称取橙皮苷10.99mg，加甲醇溶解，定容至25ml，作为对照品贮备液。精密吸取对照品贮备液适量，分别制成浓度为0.4396mg/ml、0.2198mg/ml、0.1099mg/ml、0.05495mg/ml、0.027475mg/ml、 0.0137375mg/ml的对照品溶液,分别吸取上述溶液20μl,进样测定，以峰面积定量。橙皮苷的回归方程为： y=154726.7094x+9005.8,r=0.9997；线性范围为0.27475～8.792μg。
2.2.3 调脾合剂橙皮苷的含量测定
精密吸取调脾合剂20ml,加水饱和正丁醇振摇萃取3次，每次20ml,合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解，用甲醇定容至10ml容量瓶中，摇匀，即得，进样20μl。
2.2.4 选择性试验
分别取对照品溶液、样品溶液﹑阴性溶液20μl 注入色谱仪, 记录色谱图。图中可见样品色谱峰与其他杂质峰分离良好, 即本实验条件下橙皮苷与其他组分分离良好。
2.2.5 重复性试验
取同一批样品,按“2.2.4”制备6份供试品溶液,测定橙皮苷的含量,结果RSD = 0.74%(n=6)。
2.2.6 精密度试验
取对照品溶液(浓度为0.4396mg/ml)。连续进样5次，每次进样20μL,测得橙皮苷的峰面积。结果RSD = 0.65%（n=5）。
2.2.7 稳定性试验
取同一供试品溶液进样5次,测定橙皮苷的峰面积,结果RSD =0.86% (n=5)。
2.2.8 加样回收率试验
取已知含量的调脾合剂,精密量取20ml,分别加入橙皮苷对照品溶液(0.4mg/ml) 3 mL按“2.2.3”项下方法制备,测定橙皮苷的含量,结果平均回收率为98.72%, RSD=1.93%(n=6)。
3 小结与讨论
3.1 我们对调脾合剂中的陈皮、山楂进行了薄层定性鉴别，均为阳性。方法简便易行，重现性好。
3.2 在进行含量测定时，我们比较了两种方法即甲醇处理法和水饱和正丁醇萃取法，结果表明甲醇处理法杂质较多，分离效果不理想。而水饱和正丁醇萃取法，被测组分与其他组分有较好分离，且重现性好，精密度高。
参 考 文 献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：化学出版社，2005.附录31.
