维生素E和硒对大鼠血清中抗氧化酶活性的影响
【摘要】 目的 探讨维生素E和硒对大鼠血清中抗氧化酶活性的影响。方法 将健康Wistar大鼠32只随机分成4组:正常饲料组;维生素E组；硒组；维生素E加硒组。喂养至十周末,处死大鼠,按试剂盒要求取其血液制成血清测GSH-Px、SOD活性。结果 维生素E组和硒饲养组的大鼠与正常饲料组比较,血液中GSH-Px和SOD活性升高(P<0.05)；维生素E、硒联合组分别与维生素组、硒组比较， GSH-Px、SOD活性升高(P<0.01)。结论 维生素E和硒能提高大鼠血液中的抗氧化物质的活性，维生素E与硒联合后其抗氧化作用更强。
【关键词】 维生素E 硒 抗氧化作用
EFFECTS OF VITAMIN E AND SELENIUM ON
Abstract Objective To study the change of anti-oxidative activity of selenium or vitamin E in rats. Methods thirty-two healthy male Wistar rats were divided into four groups randomly. They were fed on diet with normal selenium and vitamin (group 1), vitamin (group 2), selenium (group 3), selenium plus vitamin (group4) correspondly. All rats were killed at the end of the tenth week. GSH-Px, SOD activity content in serum of each rat was measured. Results Experimentation showed that compared with the control, the GSH-Px and SOD activity were increased in group 2 and group 3;the GSH-Px and SOD activity can be increased higher in group 4 than in group 2 or in group 3,respectively. Conclusion The anti-oxidation activity in rats can be increased by selenium or vitamin E and can be increased higher by selenium and vitamin E.
Key words Vitamin E Selenium Anti-oxidative activity
研究发现机体的多种疾病都与自由基对机体的氧化损伤有关。机体通过自我产生或从外界摄取的方式获得超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、维生素、微量元素等抗氧化剂，这些抗氧化剂对自由基的损害构成了一个天然的屏障［1］。维生素E是一种脂溶性的维生素，具有许多重要的生理功能。硒是机体重要的微量元素，在体内抗氧化系统中发挥重要的作用。本实验通过用含维生素E和硒的饲料喂养大鼠，观察含维生素E饲料和含硒饲料喂养大鼠引起血液SOD、GSH-Px含量的改变,探讨维生素E和硒的抗氧化作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组
雄性4个月Wistar大鼠32只，体重250～350 g,常规饲料喂养1周后随机分成4组，每组8只：①常规饲料组,即对照组；②常规饲料加维生素E组（400mg/kg），即维生素E组；③常规饲料加硒组（2mg/kg），即硒组；④常规饲料加维生素E和硒组（维生素E400mg/kg，硒2mg/kg）,即维生素E加硒组。
1.2 试剂和仪器
维生素E（厦门鱼肝油厂）；亚硒酸钠（Sigma公司）；SOD、GSH-Px试剂盒(南京建成生物工程研究所)。RF-540型荧光分光光度仪(日本岛津公司)，半自动生化分析仪(英国HLTACHI公司)，Konelab 60i全自动生化分析仪(芬兰Konelab公司)。
1.3 实验方法
用荧光分光光度法检测饲料中硒含量为2 mg/kg，HPLC法检测饲料中维生素E含量为400 mg/kg。动物共饲养10周，10周末断头处死大鼠后立即取其血液制备成血清,用英国半自动生化分析仪在540 nm下测出每个标本的SOD数值，用芬兰全自动生化分析仪在405 nm下测出每个标本的GSH-Px值。
1.4 统计方法
实验数据均以均数±标准差表示，数据处理使用SPSS 13.0软件，单因素方差分析(ANOVA)进行组间差异的显著性检验，两组间比较用最小极差法(LSD)。P<0.05表示差别有显著性。
2 结果
2.1 维生素E组、硒组与对照组比较结果（见表1）表1维生素E组、硒组，对照组SOD、GSH-Px含量值 维生素E组与对照组比较，血清SOD和GSH-Px活性升高（P<0.05)。硒组与对照组比较，血清SOD和GSH-Px活性也升高（P<0.05)。维生素E组与硒组比较，血清SOD和GSH-Px活性没有差异（P>0.05)。
2.2 维生素E加硒组与对照组比较结果（见表2） 表2维生素E加硒组、对照组SOD、GSH-Px含量值注：与对照组比较：﹡ P<0.01.
维生素E加硒组血清中SOD为189.37 NU/mL，与对照组比较其值明显升高 (P<0.01)，SH-Px含量为95.11 u/L，该值也高于对照组(P<0.01)。
2.3 维生素E加硒组分别与维生素E组、硒组比较结果（见表3）
表3维生素E加硒组与维生素E组、硒组SOD、GSH-Px含量值
组别SOD（NU/mL）GSH-Px(u/L)维生素E组119.30±4.3381.24±2.25硒 组112.96±6.1187.22±4.51维生素E加硒组189.37±3.13﹡△95.11±3.31﹡△ 注：维生素E加硒组与维生素E组比较：﹡ P<0.01；与硒组比较:△P<0.01.
维生素E加硒组分别与维生素E组和硒组比较, 维生素E加硒组大鼠血清中SOD和GSH-Px活性均明显高于维生素E组和硒组 (P<0.01)。
3 讨论
维生素E能消除多种自由基，还可促进氧化型谷胱甘肽生成还原型谷胱甘肽以保护巯基酶,间接促进过氧化氢的分解,清除体内过多的自由基,阻断生物膜脂质过氧化反应,稳定膜结构,保护膜功能。维生素E可阻止SOD的下降［2］。本次实验也证实维生素E可增加SOD和GSH-Px的活性。
硒是人体必需的微量元素，对线粒体损伤有保护作用，线粒体DNA易受到自由基等毒性物质攻击而受损,线粒体对脂质过氧化作用和氧化应激较敏感，损伤后又不能被修复而积累，导致细胞老化，加硒可增强机体抗氧化能力,保护神经细胞和线粒体免受自由基损害［3］。试验饲料中添加硒使SOD、GSH-Px的活性上升。由于硒本身为GSH-Px的组成成分，加硒可增加血清中GSH-Px的含量，同时硒具有直接清除自由基的作用，促进脂质过氧化物分解而起抗氧化作用。
本次研究发现，联合补充维生素E和硒，大鼠血液中SOD活性明显增加，这与许多人报道的维生素E和硒联合具有协同作用相一致［4，5］。由于硒是GSH-Px的组成部分,而维生素E是存在于生物膜上的主要脂溶性抗氧化物,二者皆可保护细胞膜免遭脂质过氧化的损害，其机制与硒和维生素E的抗氧化侵袭作用改善了全身组织的机能代谢作用有关，也可能与维生素E能维持体内硒的活性，抑制体内硒的排出和预防膜脂自身氧化，减少过氧化氢生成，从而减少了破坏代谢过氧化氢所需的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶和SOD的量有关［4］。
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