内皮细胞损伤、血小板活化及功能状态与2型糖尿病的相关性

【关键词】  内皮损伤

　　Correlation between vascular endothelial cell injury, platelet activation and functional status in type 2 diabetes

　　【Abstract】 AIM: To investigate the vascular endothelial cell injury and the platelet activation and functional status change  in type 2 diabetes patients. METHODS: The plasma levels of von willebrand factor∶antigen (vWF∶Ag) and granule membrane protein140（GMP140）were measured by double sandwich ELISA. The adhesiveness of platelet was determined by Salzmans method. RESULTS: The plasma levels of vWF∶Ag（145.6±25.6）％，GMP140（16.8±3.5）μg/L and PAdT （80.3±5.3）％ of type 2 diabetes were significantly higher than those of normal controls（P<0.05）; The plasma levels of these markers in the group of type 2 diabetes with vascular complication were higher than those in the one without vascular complication（P<0.05）; plasma levels of GMP140 and PAdT were positively correlated with those of vWF∶Ag［（160.8±35.6）％，（18.9±5.5）μg/L，（89.5±7.8）％, r=0.446, 0.413, P<0.05］. CONCLUSION: Type 2 diabetes can cause vascular endothelial cell injury, platelet activation and functional status change. The plasma levels of vWF∶Ag, GMP140 and PAdT may reflect vascular pathological changes in type 2 diabetes patients to a certain extent.

　　【Keywords】 diabetes； endothelial cell injury；platelet activation；angiopathies

　　【摘要】 目的： 观察2型糖尿病患者内皮细胞损伤、血小板活化及功能状态的变化及临床意义. 方法： 利用双抗体夹心 ELISA法测定血浆血管性血友病因子抗原vWF∶Ag，血小板膜表面α颗粒膜蛋白GMP140水平；采用玻珠柱法测定血小板黏附率PAdT. 结果： 糖尿病组血浆vWF∶Ag（145.6±25.6）％，GMP140（16.8±3.5）μg/L，PAdT（80.3±5.3）％水平显著高于对照组（P<0.05）；有血管病变的患者血浆vWF∶Ag（160.8±35.6）％，GMP140（18.9±5.5）μg/L，PAdT（89.5±7.8）％水平显著高于无血管病变组（P<0.05）；相关分析显示，GMP140，PAdT水平与血浆vWF∶Ag水平显著正相关（r=0.446，0.413，P均<0.05）. 结论： 2型糖尿病患者均存在血管内皮损伤，并由此引起血小板活化及血小板功能状态的改变；血浆vWF：Ag，GMP140及PAdT水平在一定程度上可反映2型糖尿病患者血管病变的情况.

　　【关键词】 糖尿病；内皮损伤；血小板活化；血管病变

　　0引言

　　血管病变是糖尿病患者死亡和致残的主要原因，对糖尿病血管病变的发病机制做深入探讨，并据此采取适当的防治方法是十分必要的. 我们对糖尿病患者血浆vWF∶Ag, GMP140含量以及PAdT进行了检测，探讨糖尿病血管病变形成因素并以期指导临床合理用药（降糖、抗血小板、保护血管）以缓解或延迟并发症的发生.

　　1对象和方法

　　1.1对象2型糖尿病患者68(男37，女31)例，年龄（50±11.5）岁，病程0.5～23 a, 均符合1997年美国糖尿病学会（ADA）诊断标准.  并发大血管病变（经临床、心电图及影像学检查证实为冠心病、脑血管病及肢体动脉缺血性病变）和/或微血管病变（经眼底检查证实为糖尿病视网膜病变及尿白蛋白排泄率>20 μg/min的糖尿病肾病）者35例；未发现血管病变者33例. 抽血前2 wk均未服用抗凝及血管保护药物. 对照组为健康成人60(男40，女20)例，年龄（50±12）岁.

　　1.2方法上午08:00/09:00空腹采集肘静脉血置于含有129 mmol/L枸橼酸钠（测定GMP140用20 g/L EDTANa2）抗凝剂的塑料离心管中，9∶1抗凝，3000/min离心10 min，分离血浆置-20℃低温冰箱中保存，用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)法测定vWF∶Ag，GMP140水平(GMP140试剂盒由上海太阳生物制剂公司提供；vWF∶Ag试剂盒由上海捷门公司提供). 血小板黏附性测定（PAdT）：采用玻珠柱法，血小板黏附管为内径3 mm，长9.4 cm的塑料管. 内装直径为0.3～0.5 mm玻璃珠1.5 g，塑料管两端封以孔径0.05 cm的尼龙布. 操作遵守《全国临床检验操作规程》中提供的标准方法.

　　统计学处理：数据以x±s表示，组间比较采用方差分析，各实验指标间作直线相关分析. P<0.05为差异有统计学意义.

　　2结果

　　糖尿病组vWF∶Ag，GMP140，PAdT水平均显著高于对照组（P<0.05）；有血管病变的患者组vWF∶Ag，GMP140，PAdT水平显著高于无血管病变组（P<0.05，表1). 糖尿病患者GMP140，PAdT水平与血浆vWF∶Ag水平显著正相关（r＝0.446，0.413， P<0.05）.

　　表12型糖尿病患者vWF∶Ag，GMP140，PAdT水平(略)

　　aP<0.05，bP<0.01 vs正常组； cP<0.05，dP<0.01 vs无血管病变.

　　3讨论

　　vWF是血管内皮细胞合成、分泌的一种糖基化蛋白质，血浆vWF升高被认为是血管内皮细胞受损的标志，血管内皮损伤常常是血液高凝状态和血小板活化的重要诱因［1-3］. 本研究显示2型糖尿病患者血浆vWF水平显著增高，提示患者存在内皮损伤. GMP140是一种新近发现的血小板膜糖蛋白，在血小板和内皮细胞受到刺激时表达增加，测定血小板表面及血浆GMP－140水平可以作为血小板激活的一个新的标志，GMP140能介导血小板和内皮细胞、白细胞和内皮细胞之间的黏附，在启动和扩大血栓形成过程中具有重要意义［4］. 本研究显示糖尿病患者GMP140水平显著增高，且血管病变组升高更为明显，说明糖尿病患者尤其是合并血管病变者血小板处于明显活化状态. 本研究显示糖尿病患者血小板黏附率显著增高，血小板黏附率与内皮损伤密切相关. PAdT增高的原因可能与患者血管内皮细胞受损，血液中存在高浓度的vWF及血小板处于高活化状态有关［3］. 综上所述，糖尿病患者血管内皮细胞的损害，血小板活性的增强、血液高凝状态使糖尿病成为心血管病变，特别是动脉粥样硬化的高危因素. 故敏感、特异、有效地监测能反映糖尿病患者血管内皮损伤、血小板活化和功能状态改变的指标，对指导临床合理用药（降糖、抗凝、纤溶、抗血小板、保护血管）以缓解或延迟并发症的发生具有重要意义.

　　【】

　　［1］ Ruggeri ZM. Structure of von Willebrand factor and its function in platelet adhesion and thrombus formation［J］. Best Pract Res Clin Haematol, 2001,14: 257-279.

　　［2］ Pearson JD.Endothelial cell function and thrombosis［J］. Best Pract Res Clin Haematol,1999,12: 329-341.

　　［3］ Yamada T, Sato A, Nishimori T, et al. Importance of hypercoagulability over hyperglycemia for vascular complication in type 2 diabetes［J］. Diabetes Res Clin Pract,2000,49:23-31.

　　［4］ 王鸿利，王学锋. 血栓病临床新技术［M］. 北京：人民军医出版社，2003: 400-410.