辛温解表法对小鼠粘膜免疫功能的影响
2.4 呼吸道灌洗液sIgA测定
(sIgA-R)各组标本获取方式同黏多糖测定,用ELISA方法。
2.5 肠灌洗液黏多糖测定
(IS,咔唑比色法)小动物分组、给药同“2.1”,末次给药后禁食、禁水,末次给药4 h断颈处死小鼠后剖腹,从回盲部5 cm处开始向上剪取小肠15 cm,用5 ml生理盐水冲洗内容物,离心取上清液,检测方法同“2.3”。
2.6 肠灌洗液sIgA测定
(sIgA-I) 各组标本获取方式同肠黏多糖,测定用ELISA方法。
3 结果
3.1 对小鼠气管粘膜病理改变的影响 光镜下观察,正常组气管粘膜上皮完整,细胞排列整齐。模型组可见管腔内上皮细胞排列紊乱、气管上皮脱落、慢性炎细胞浸润以及粘膜灶性坏死、溃疡,同时伴有轻度的增生现象。各用药组也存在一定程度的气管上皮脱落、慢性炎细胞浸润以及粘膜的灶性坏死,但程度明显较模型组轻且动物数少。
3.2 对小鼠纤毛运动、RS和sIgA-R、IS和sIgA-I的影响
结果见表1,与模型对照组相比较,麻黄汤能促进小鼠气管纤毛运动,麻黄汤、桂枝汤均能增加sIgA-R和sIgA-I的含量(P<0.05),麻黄桂枝各半汤仅能增加sIgA-I的含量;麻黄汤和桂枝汤能增加RS和IS的含量(P<0.05或P<0.01),麻黄桂枝各半汤能增加IS含量,对RS无明显作用。表1 辛温解表三方对小鼠CM,RS,sIgA-R,IS,sIgA-I的影响(略)
4 讨论
辛温解表法的代表方剂主要有麻黄汤、桂枝汤、九味羌活汤、小青龙汤以及相关加减方等,临床除了应用于感冒等外感热病以外,也广泛应用于哮喘、慢性肾炎、风湿性关节炎、银屑病等内科杂证[2,3]。对此,现代学者对辛温解表方药的作用机制进行了有意义的探索工作,并取得了大量的成果,主要体现在解热、镇痛、抗炎、抗菌抗病毒以及免疫调节等多方面[4,5],为辛温解表法内涵的科学阐释提供了丰富的依据。
呼吸道粘膜是机体防御作用的第一道屏障,借助机械屏障(紧密连接、纤毛运动、黏液毯等)、免疫屏障(sIgA等)对病原微生物发挥直接清除或杀灭作用,其功能的损害是多种疾病发生的重要病理环节[6,7]。目前有关辛温解表方药对呼吸道粘膜屏障干预作用的研究不多,以日本学者Nagai等对小青龙汤(桂枝、麻黄等组成)的研究较为全面。实验结果表明,小青龙汤可增加鼻腔以及支气管肺泡灌洗液中sIgA的含量,但体外试验中,小青龙汤不能抑制流感病毒的复制;进一步研究表明小青龙汤能增加流感病毒感染小鼠鼻淋巴结病毒血凝素特异的sIgA分泌细胞,也可增加肠粘膜IL-2受体β阳性T淋巴细胞[8]。丁建中等[9]研究表明,具有解表散寒作用的杏苏散可增加小鼠呼吸道黏多糖、肠液黏多糖含量。另外,现代学者已证实“肺与大肠相表里”的科学性,两者通过“共同粘膜免疫”及“归巢”作用相互联系,IgA是体现“肺与大肠相表里”的重要物质基础[10]。本研究显示辛温解表三方能改善流感病毒感染小鼠气管粘膜上皮的病理损伤,其中麻黄汤、桂枝汤能增加支气管肺泡灌洗液和肠灌洗液中sIgA的含量,麻黄桂枝各半汤能增加肠灌洗液中sIgA的含量;3方对灌洗液粘多糖的含量以及呼吸道粘膜机械屏障的作用也各侧重。这说明辛温解表法对呼吸道粘膜屏障的干预作用或许是其治疗外感热病的关键环节之一。当然,随着研究的深入,还有许多需要回答的问题:辛温解表法对粘膜屏障的干预作用是否有共同的物质基础;对纤毛运动、上皮细胞、以及粘膜免疫应答的分子生物学过程等等,这些都是完善“汗法”理论需要完成的研究工作。
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[10]靳文学,杨宇.从粘膜免疫系统看“肺与大肠相表里”[J].四川中医,2005,23(12):1.