白背叶提取物A对人肿瘤细胞增殖的抑制作用研究
【摘要】 目的观察白背叶提取物A对肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法采用四唑盐比色实验(MTT法),以半数抑制浓度(IC50)为评价抗肿瘤活性强度的指标,分别对4种常见的人恶性肿瘤细胞进行抗肿瘤活性的筛选。结果白背叶提取物A在浓度为5 μg/ml时对人胃癌细胞SGC-7901,人肺癌细胞A549有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01),其IC50分别为27.14 μg/ml,33.08 μg/ml;在浓度为20 μg/ml 时对人结肠癌细胞LoVo有抑制作用(P<0.05),其IC50为36.82 μg/ml;在浓度为40 μg/ml 时对人肝癌细胞Bel-7404有抑制作用(P<0.05),其IC50为37.70μg/ml。结论白背叶提取物A对以上4种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用。
【关键词】 白背叶提取物A;抗肿瘤;四唑盐比色实验
白背叶Mallotus apelta Muell-Arg.为双子叶植物药大戟科植物白楸的叶,又名白背娘、白背桐,为岭南地区民间常用草药。在我国分布较广,资源较丰富,可见于广东、广西、湖南、福建、浙江、安徽、河南等地。白背叶全年可采,鲜用或晒干。中国壮药原色图谱记载其味苦,性平,具清热、解毒、祛湿、止血之功效[1]。本实验对白背叶提取物A进行了抗肿瘤作用的筛选研究。现将结果报道如下。
1 材料与仪器
1.1 药物
白背叶提取物A由广西大学化学教研室提取分离,为淡黄色单体成分。
1.2 肿瘤细胞株
本实验所用细胞株均购自南京凯基生物有限公司。
1.3 试剂
RPMI-1640干粉(美国Gibco公司产品);新生牛血清(杭州四季青公司产品,批号 080508);四甲基二氮唑蓝(北京拜尔迪生物公司分装,Amresco 0793);二甲基亚砜(博大泰克公司产品);0.25%胰蛋白酶(美国 Hyclone Lab公司产品);注射用生理盐水(武汉滨湖双鹤药业有限公司产品,批号 080429);顺铂(齐鲁制药有限公司,批号 701003CF)。
1.4 仪器
ELX-800型酶标仪(美国 BIOTEK公司产品);311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品);DLF560型超净工作台(荷兰clear Air Techniek bv公司产品);细胞培养瓶(加拿大 BIOFIL公司产品);96孔板(加拿大 BIOFIL公司产品);倒置显微镜(德国Leica);微量移液器(法国 Pipetman公司产品);十万分之一电子天平(德国赛多利斯产品)。
1.5 培养液及试剂的配制
RPMI-1640不完全培养液:不加血清的RPMI-1640培养液;RPMI-1640完全培养液:10%新生牛血清+RPMI-1640不完全培养液+双抗(青霉素+链霉素,浓度各为100 U/ml)。