不同产地一点红总生物碱的提取与分析
2.5.2 提取时间的确定称取一点红药材粗粉3份，每份约0.5 g，精密称定，置50 ml具塞锥形瓶，加入4滴浓氨水，精密加入氯仿50 ml。分别超声提取15，30，45，60 min ，冷却，补足失重，滤过，取续滤液1.00 ml用氯仿定容至10 ml，样液备用。取5.00 ml样液加入10 ml显色剂，密塞，振摇2 min，静置2 h，取氯仿层，以5 ml未加样的氯仿做空白参比，在414 nm处测吸光度值。结果见表2，超声提取30 min提取量较高。表2 不同超声提取时间的对比（略）
2.6 精密度实验取苦参碱对照品溶液，按显色条件显色后，于414 nm处测其吸光度，连续测定，吸光度的RSD为0.125%(n=6)，结果显示仪器精密度良好。
2.7 稳定性实验取供试品溶液显色后于0，1，2，3，4，5 h进行吸光度测定，供试品溶液吸光度的RSD为0.537%（n=6）。结果显示样品溶液显色后在5 h内测定稳定。
2.8 重复性实验取同一批号一点红6份，精密称定，按照样品测定项下制备供试品液，进行测定,测得吸光度RSD为1.176%(n＝6)，结果说明方法重复性良好。
2.9 加样回收率实验取同一批已知含量的一点红全草粗粉6份，分别精密加入苦参碱对照品液适量，混匀蒸干，按照样品测定项下操作，测定含量，结果平均加样回收率为99.0%，RSD＝1.49%(n＝6)。结果见表3。表3 加样回收率（略）
2.10 样品测定取6个不同产地的一点红全草粗粉约0.8 g，置具塞锥形瓶中，加入浓氨水4滴，精密加入氯仿40 ml，超声提取30 min，冷却，补足失重，滤过，精密吸取续滤液1 ml用氯仿定容至10 ml备用。取5 ml样液至分液漏斗，加入溴麝香草酚蓝显色剂10 ml，密塞，剧烈振摇2 min提取，静置2 h，分取氯仿层，以未加样液的氯仿层为空白，在414 nm波长处测吸光度。结果一点红总生物碱含量在0.441%～0.756%，不同产地的一点红中总生物碱含量累积存在着一定差异，贵州贵阳的一点红总生物碱含量最高，广东两产地的次之，广西3个产地的一点红总生物碱含量相对较低。结果见表4。表4 不同产地样品测定（略）
3 讨论
根据查阅文献，未见有相关一点红总生物碱含量测定的报道，本实验利用生物碱显色后进行光谱扫描，寻找到苦参碱为合适的对照品，经显色后与总生物碱样品液在414 nm波长处均有较大吸收。故以苦参碱为总生物碱含量考察的对照品，414 nm为检测波长。
实验采用超声提取技术，具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点，利用超声波产生的强烈振动、高加速度、空化效应、搅拌作用等，加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且避免回流提取中高温对提取成分的影响。实验曾试用乙醇、丙酮、醋酸乙酯、甲苯、氯仿作为提取溶剂，发现氯仿碱提法提取效果较合适较好。
一点红资源丰富，是我国南方部分地区人们喜爱的野菜或清凉解暑的凉菜［11］，也是我国传统中药之一，具有广泛的开发和利用价值。实验以苦参碱为对照品，通过检测不同产地一点红生物碱含量，建立了适合一点红药草质量检测的方法，方法准确可靠，结果满意。从各产地采集的样品总生物碱含量来看，不同产地、不同的生长环境、温度、湿度等多种因素对总生物碱的含量影响很大。提示我们是否可以选择最适宜生长条件的地域建立药材的GAP生产基地，进行大规模规范化的栽培和生产，提高药材内在质量的稳定性，保证临床用药安全性和有效性。
【参考文献】
［1］陈航燕，卢海涛，余同珍．草药一点红治疗静脉炎197例临床观察［J］．广东药学院学报，2005，21(1)：11.
［2］韦飞燕.花红片薄层色谱鉴别研究［J］.广西中医学院学报，2000，17（1）:65.
［3］Shylesh B S，Padikkala J.Antioxidant and anti-inflammatory activity of Emilia sonchifolia［J］.Fitoterapia,1999,70:275.
［4］Muko K N，Ohiri F C. A preliminary study on the anti-inflamimatory properties of Emilia sonchifolia leaf extracts［J］.Fitoterapia,2000,71:65.
［5］李秀信，王荣花，杨秀萍.一点红黄酮成分的分析及含量测定［J］.西北植物学报，2003，23(4):671.
［6］李军生，阎柳娟，苏辉武，等. 一点红黄酮类化合物分离及其抗菌性能研究［J］. 食品科学，2007，28（9）：196.
［7］廖莉 ，罗建华 ，蒙春越，等.一点红总黄酮的提取及对羟自由基的清除作用研究［J］.时珍国医国药,2008,19(2):415.
［8］周吴萍，韦媛媛，李军生，等.广西传统中药一点红总黄酮含量分析［J］.时珍国医国药，2008，19(7):1593.
［9］周吴萍，李军生，韦媛媛，等. 不同产地与不同采收期一点红总黄酮含量分析［J］.食品科学，2008，29(09)：469.
［10］周吴萍，韦媛媛，李军生，等. 广西一点红总生物碱的提取和抗菌活性研究［J］. 时珍国医国药，2008，19(8):1835.
［11］刘厚诚.一点红及其栽培技术［J］.长江蔬菜，2002，11：12.
