不同寄主植物桑寄生总黄酮含量研究

　　2.3  总黄酮提取

　　工艺设计根据前期试验结果，选择乙醇浓度（A）、提取时间（B）、提取温度（C）、料液比（D）为实验因素。因素水平见表1。实验结果见表2。通过正交实验和数据处理发现，影响桑寄生茎枝总黄酮提取率的因素主次顺序为A＞B＞C＞D,最佳提取条件为A1B2C2D3，即乙醇浓度为60%，超声提取时间为30 min,超声提取温度为45℃，料液比1∶25;影响桑寄生叶总黄酮提取率的因素主次顺序为A＞D＞C＞B,最佳提取条件为A2B1C2D3,即乙醇浓度为70%，超声提取时间为20 min,超声提取温度为45℃，料液比1∶25。表1  提取工艺参数设计（略）表2  L9(43)提取工艺条件正交实验结果（略）

　　2.4  稳定性实验

　　精确吸取样品溶液2 ml，依法显色20 min后至100 min内，在波长408 nm，每隔10 min 测定1次吸收度。结果表明，显色后室温放置20～100 min内，其吸收度稳定，RSD为1.89%。

　　2.5  精密度实验

　　精确吸取样品溶液2 ml，依法显色20 min后，在波长408 nm，重复测定6次，RSD为0.66%，表明仪器的精密度好。

　　2.6  重复性实验

　　精确吸取6份芦丁标准溶液各1.0 ml，依法显色后，测定吸收度，RSD为1.37%，表明本方法的重复性好。

　　2.7  加样回收率

　　实验精确称取已知含量的桑寄生0.5 g，5份，分别加入一定量的芦丁对照品，依法测定含量，平均回收率为98.32%，RSD为1.70%。

　　2.8  样品制备与测定

　　分别称取不同寄主的桑寄生茎枝、叶各0.5 g，按照茎枝、叶的最佳提取条件进行提取，每个样品提取两次，乙醇用量为12.5 ml/次，离心分离，合并两次提取液，提取液用石油醚萃取3次除去其它色素，用相同浓度的乙醇定容至25ml。精密吸取样品液0.5ml,依法显色测吸收度用标准曲线计算样品总黄酮含量，每个样品重复3次实验，取平均值。结果见表3。表3  不同寄主来源的桑寄生总黄酮含量（略）

　　3  讨论

    实验结果表明，不同寄主的桑寄生总黄酮含量表现出一定的差异性，在桑寄生茎枝中，不同寄主的桑寄生茎枝总黄酮含量为4.10～7.82 mg/g,其中来自人工种植以桑树为寄主的桑寄生茎枝的总黄酮含量最高；在桑寄生叶中，不同寄主的桑寄生叶总黄酮含量为18.33～32.08 mg/g,其中以夹竹桃为寄主的桑寄生叶黄酮含量最高，桑寄生叶的总黄酮含量比桑寄生茎枝的总黄酮含量要高出4倍左右。

    同是以桑树为寄主，人工种植的桑寄生无论茎枝还是叶的总黄酮含量比野生的桑寄生总黄酮含量高，可能是与桑寄生生长年龄不同有关，本实验采集的人工种植桑寄生为一年生样品，总黄酮含量是否与桑寄生生长年龄有关，有待于进一步实验研究。

【参考文献】
  　［1］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：210.

　　［2］龚祝南,王铮涛,徐珞珊,等. 中国桑寄生科Loranthaceae药用植物研究［J］.中国野生植物资源,1996,1:11.

　　［3］马陶陶,张群林,李俊,等.三氯化铝比色法测定中药总黄酮方法的探讨［J］.时珍国医国药,2008,19（1）:54.

　　［4］何书美,刘敬兰.茶叶中总黄酮含量测定方法的研究［J］.分析化学简报,2007,35（9）:1365.