磁分离酶联免疫测定技术在甲状腺激素测定中的应用价值
来源:岁月联盟
时间:2017-02-28
2.4方法
(1)抗原、抗体反应,标本与反应试剂加入专用试管后,37℃保温,形成抗原抗体复合物。
(2)磁抗体分离,加入磁性抗体,使之与复合物结合。在磁场的作用下沉淀,并洗去未结合的物质。
(3)以单磷酸酚酞为基质,抗体、抗原复合物中的标记酶(ALP),催化基质分解生成酚酞,在碱性环境中显桃红色,颜色的深浅与激素的量成正比(竞争法成反比)。
(4)比色定量将已显色的测定管在SEROZYME测定仪利用三波长比色原理,滤去不良因素,拓展比色范围,计算出测定管激素含量。
3 讨论
磁分离酶联免疫测定技术(MAIA)是80年代中期瑞士史洛诺(Serono)诊断中心发明的一项高灵敏度的酶免技术。该技术中的“免疫磁性微粒”是医学生物学领域分离材料方面的一项重大科技成果。是快速、准确分离微量物质的关键材料。史洛诺(Serono)比色仪也是一个高科技产品,它采用三波长原理,550波长时吸光度最大(对反应终产物),492波长吸光度是550波长的五分之一,因此对高浓度标本无需稀释即可进行比色,结果乘以5,仪器自动转换,630波长,可过滤因擦痕手印、脏物对比色所产生的影响。MAIA试剂无放射元素,无致癌物,有效期长,并具有操作简单,实验时间短,抗原抗体反应迅速、安全,特异性强,重复性好,显色稳定的优点。与目前广泛应用的放射免疫法比较,两法结果符合率达92.72%,呈高度相关,r=0.974,P<0.0001。这些已被国内文献所肯定。
本文采用MAIA法测定来自内蒙各地健康体检者153名(男77名,女76名)甲状腺激素,包括总T3、总T4、TSH、FT3、FT4。与上海地区正常参考值比较,结果发现,上海地区男性总T3、总T4、FT3、FT4与内蒙地区男性比较有显著性差异,P<0.01;上海地区女性FT3、FT4与内蒙地区女性比较有显著性差异,P<0.01,总T3有差异,P<0.05,国内与国外正常参考值比较:总T4、FT3、FT4、TSH有显著性差异,P<0.01。我们认为,造成这些差异的原因可能是,人种,民族,饮食习惯,地理环境,气象条件及甲状腺疾病高发区等因素。究竟何种因素占主导,有待进一步探讨。
在正常血清中加入高脂血清,最终浓度为3.23mmol/L(是正常人的2倍),是许多中老年人很容易达到的水平。经统计学处理,对T3试验有影响,F=11.65,对其余指标无影响。高糖血清20mmol/L,血红蛋白13g/L,对试验无影响。这说明MAIA试验分离抗原、抗体完全,特异性强,影响因素(无论是单一因素,还是多种因素)较小,是一种非常先进的试验。
我们结合临床患者症状,B超诊断,治疗后结果观察和临床医师的最后诊断,做了准确评价。经统计学处理,灵敏度95%,特异性94.6%、误诊率5.4%,漏诊率5%、符合率96%。这证明MAIA是一项诊断甲状腺疾病灵敏度高,特异性强,重复性好的试验方法,为我区医生对疾病诊断与疗效监测提供了实际参考,为MAIA试验在我区迅逮发展推广提供了理论依据。
参 考 文 献
[1]李代渝.泸洲医学院学报,1996,19(3)23.
[2]冯根宝.中华流行病学杂志,1997,18(3)60.
[3]史大庆.内蒙古医学杂志,1999,31(增刊)179.
[4]陈兵.同位素,1996,9(3):182.
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