早期自然流产患者蜕膜组织中iNOS的表达及意义
NO是一种免疫活性分子,广泛分布于机体各组织和细胞浆内,具有重要的免疫学功能。NO不仅能调节酶活性,改变血管紧张性,调节血小板功能,而且参与炎症反应、神经传导、淋巴细胞增殖过程,以及多种女性生殖过程,如排卵、种植、维持妊娠、调节分娩、调节月经周期,并且还是介导巨噬细胞毒作用及细胞凋亡的关键介质[4,5,6]。NO来源有赖于关键酶NOS的作用。既往研究表明,与免疫有关的主要是诱生型 NOS(inducible NOS,iNOS),iNOS可在单核巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等多种免疫活性细胞中表达。iNOS通过cGMP使T细胞封闭于G0/Gl期,不能对IL-2R产生应答,细胞免疫下降即TH1型反应下降,从而使NO通过调节THl/TH2免疫平衡维持妊娠耐受。NO不仅是胎盘屏障的构成基础,而且还可以通过免疫调节在妊娠免疫耐受中发挥重要作用。当iNOS呈正常表达时,NO的免疫活性在滋养细胞主要表现为免疫调节作用,维持妊娠免疫耐受。本研究结果显示,大部分正常早孕组蜕膜组织的间质细胞、腺上皮细胞及腔上皮细胞浆内呈弱阳性染色,即iNOS为正常表达。
NO又是一种活性很高的自由基,其终产物过氧化亚硝酸根(ONOO-)有很强的毒性,能直接参与组织损伤,并介导炎症反应。iNOS由巨噬细胞、中性粒细胞被炎性因子激活后产生,它可催化产生大量的NO参与某些生理效应或病理生理过程。巨噬细胞来源的 iNOS对构成及维持胎盘屏障非常重要,在 iNOS的参与下,小鼠着床期滋养细胞可产生NO,从而参与血管扩张和血管形成,并介导吞噬受损伤的母体细胞的细胞毒作用,这些功能对胚胎的存活和发育具有重要意义。既往曾有研究[7]报道:早期自然流产患者绒毛组织中NO含量较正常早孕组绒毛组织中的含量减低,其作用机制可能是因为NO有抑制子宫平滑肌收缩的作用,而NO的减少可能使子宫收缩频度较正常人增加,导致流产的发生,而其究竟是流产发生的原因还是流产引致的结果,尚无定论。但也有报道认为,自然流产的发生与细胞凋亡有关,而NO可诱导细胞凋亡[8]。有学者用 RT-PCR DNA印迹证明胚胎未发现明显病变前,蜕膜巨噬细胞iNOS mRNA的表达升高与流产有密切关系,即自然流产者在流产发生前着床部位已有巨噬细胞的入侵,侵入的巨噬细胞产生大量的iNOS,使局部NO水平明显增加,产生细胞毒作用,使细胞生长停止,导致细胞程序性死亡[9]。由于NO具有脂溶性特点,可透过母胎屏障,对局部胚胎起杀灭作用[10]。本研究结果显示,大部分早期自然流产组蜕膜组织中,iNOS呈阳性、强阳性表达,即iNOS表达异常活跃,活性显著增加。
Wilson等[11]研究也证实了有流产史的患者,其NO水平也较一般妊娠妇女高,如对这一类患者提前使用 NO抑制剂如左旋氮硝基精氨酸甲酯(L-NAME)和左旋氧硝基精氨酸(LNA)则能有效避免自然流产的发生。本研究结果显示:正常早孕组与早期自然流产组iNOS在蜕膜组织中均有表达,但表达有差异,早期自然流产组患者蜕膜组织中的iNOS的表达明显高于正常早孕组。由此可见,iNOS在调节妊娠免疫时具有双重性,当其表达正常时,主要表现为免疫调节功能,维持正常妊娠;而表达过高时,发挥细胞毒作用,造成组织过度损伤,最终导致胚胎死亡而发生流产。如何利用NO对早期妊娠的调节作用,仍有待于更深入的研究。
图1 正常早孕蜕膜组织iNOS免疫组织化学法染色阳性表(放大倍数400×)
图2 正常早孕蜕膜组织iNOS免疫组织化学法染色弱阳性表达(放大倍数400×)
图3 自然流产蜕膜组织iNOS免疫组织化学法染色强阳性表达(放大倍数400×)
图4 自然流产蜕膜组织iNOS免疫组织化学法染色阳性表达(放大倍数400×)
参考文献
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