黄芪多糖及人参总皂苷对衰老小鼠的抗衰老作用

          作者：赵莲芳 ，郑玉淑 ，朴惠顺 ，张善玉

【关键词】  ,衰老;植物,药用;小鼠

       ［摘要］ ［目的］ 研究黄芪多糖（APS）及人参总皂苷（TG）对D-氨基半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用. ［方法］ 皮下注射给予D-氨基半乳糖制作衰老小鼠模型，同时每日分别灌胃给予不同组小鼠相应药物，持续8周，处死小鼠，脾脏及胸腺指数，检测血清和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性. ［结果］ APS组小鼠的脾脏指数、血清及肝组织内SOD，GSH-PX活性均明显升高;APS和TG联用组小鼠脾脏指数、血清及肝组织内SOD，GSH-PX活性均明显升高;TG组小鼠肝组织内GSH-PX活性明显升高. ［结论］ 单独使用APS或与TG联用均可提高小鼠抗氧化物酶活性，增加免疫器官质量，提示单独使用APS或与TG联用均具有较好的抗衰老作用.

　［关键词］  衰老;植物，药用;小鼠

    ABSTRACT:OBJECTIVE To study the antisenility effects of astragalus polysaccharide（APS）and total ginsenoside（TG）on senile mice induced by D-galactosamine.METHODS The senile models of mice were established by subcutaneous injection of D-galactosamine at the nape，and administrated with homologus drugs.After8weeks，the mice were killed，and the activity of superoxide dismutase（SOD）and glutathione peroxidase（GSH-PX）in serum and liver tissues were detected by biochemistry method and the weight of immune organs such as spleen and thymus were measured.RESULTS In APS group，the spleen index and the activity of SOD and GSH-PX in liver tissues and serum were increased;in APS plus TG group the spleen index，the activities of SOD and GSH-PX in serum and liver tissues were significantly increased;in TG group，the activity of GSH-PX in liver tissues was significantly increased.CONCLUSION APS and APS combination with TG can increase the activity of SOD and GSH-PX in serum and liver tissues and the weight of immunity organs，so APS and APS combination with TG have antisenility effects.Key words:senescence;plants，medicinal;mice

    黄芪多糖（astragalin polyose，APS）为黄芪的主 要有效成分，而人参总皂苷（total ginsenoside，TG）是人参的主要活性成分，大量药理及临床实验结果表明，APS，TG均具有抗衰老活性 ［1，2］ ，在促进T淋巴细胞增殖方面具有协同作用 ［3］ .本实验采用D-氨基半乳糖制作亚急性衰老小鼠模型，观察了APS，TG，APS与TG联用对衰老模型小鼠胸腺指数、脾脏指数、血清及肝组织中超氧化歧化酶（superoxide dismulase，SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）活性的影响，旨在探讨APS，TG，APS与TG联用对衰老小鼠的抗衰老作用.

　 1 材料与方法

    1.1 材料  实验动物取昆明种小鼠，雌雄兼用，体重为（20±2）g，由延边大学医学部实验动物科提供.3年生栽植黄芪采集于吉林省和龙市，由延边大学药学院生药学教研室吕惠子副教授鉴定为膜荚黄芪（Astragalus membraneaceus Fisch.）;TG为吉林省宏久生物技术有限公司产品;SOD，GSH-PX及蛋白质测试盒均为南京建成生物工程研究所产品;D-氨基半乳糖为国药集团化学试剂有限公司产品;其他试剂均为分析纯.

　 1.2 方法

    1.2.1 APS的提取及纯化  称取干燥粉碎黄芪300g，加入蒸馏水（20，10倍量），于80℃条件下提取3次（2，1，1h），过滤，滤过液浓缩至约500mL，加入无水乙醇使乙醇质量浓度为800mL/L，放置过夜.沉淀物加水溶解，过滤，应用Sevag法 ［4］ 除去蛋白7次，用氨水调整pH值至8.0，加入30g/L过氧化氢溶液，于37℃水浴中放置12h，过滤，滤过液置透析袋中流水透析12h，液体浓缩后再用乙醇沉淀，放置过夜，用无水乙醇及丙酮洗涤沉淀物，干燥，得7.1g类白色粉末状粗多糖，含量为23.7g/kg.

    1.2.2 动物分组与给药  取昆明种小鼠50只，随机分为APS组、TG组、APS和TG联用组、模型对照组及正常组，每组各为10只.每日给予除正常组外各组小鼠颈部皮下注射50g/L D-氨基半乳糖0.5mL，每日腹腔注射给予APS组小鼠200mg/kg APS，TG组小鼠40mg/kg TG，APS和TG联用组小鼠200mg/kg APS及40mg/kg TG，同时给予正常组小鼠等量生理盐水，8周后称取小鼠体重，眼眶取血，脱颈椎处死，剖取脾脏、胸腺及肝脏，称其质量，根据体重计算胸腺及脾脏指数.

    1.2.3 小鼠血清及肝组织中SOD，GSH-PX活性的测定  用生理盐水将肝组织制备成100g/L匀浆，取小鼠血清及肝组织匀浆，按照测试盒操作法测定小鼠血清及肝组织SOD，GSH-PX活性及蛋白质含量.

    1.2.4 统计学处理  实验数据以均数±标准偏差 （x±SD）表示，两样本均数比较采用t检验进行.

　 2 结果

    2.1 APS，TG对D-氨基半乳糖所致衰老小鼠胸腺及脾脏指数的影响  正常组、APS组和APS和TG联用组小鼠脾脏指数均明显高于模型对照组，相比较见均有显著性差异（P<0.05）;各组小鼠胸腺指数间无显著性差异（P>0.05）;见表1.表1 各组小鼠胸腺及脾脏指数变化（略）

    2.2 APS，TG对小鼠血清及肝组织SOD，GSH-PX活性的影响  正常组、APS组及APS和TG联用组小鼠血清SOD，GSH-PX活性均明显高于模型对照组，相比较均有显著性差异（P<0.05）;正常组及APS和TG联用组小鼠肝组织SOD活性均明显高于模型对照组，相比较均有显著性差异（P<0.05）;正常组、APS组、TG组及APS和TG联用组小鼠肝组织GSH-PX活性均明显高于模型对照组，相比较均有显著性差异（P<0.05）;见表2.表2 各组小鼠血清及肝组织SOD，GSH-PX活性的变化（略）

    3 讨论

    在衰老机制研究中，自由基学说已受到广泛的关注，它认为随着年龄的增长，人体内自由基产量增多、机体自身的抗氧化系统活性降低及免疫功能下降等是机体衰老的主要原因 ［5，6］ .在一定时间内，给小鼠连续注射大剂量D-氨基半乳糖可使小鼠体内自由基产生过多，使抗氧化防御作用减弱，导致体内氧自由基不能完全清除，短期内可引起衰老 ［7］ .本实验结果示，模型对照组小鼠脾脏指数明显低于正常组，血清及肝组织中SOD和GSH-PX活性亦明显降低，提示D-氨基半乳糖制作小鼠亚急性衰老模型方法可行.本实验结果表明，单独使用APS或与TG联用，均可明显提高D-氨基半乳糖致衰老小鼠脾脏指数，而单独使用TG则无明显的作用，而且APS可明显提高D-氨基半乳糖致衰老小鼠血清SOD，血清及肝组织GSH-PX活性，TG可明显提高小鼠肝组织GSH-PX活性，而APS与TG联用亦可明显提高小鼠血清及肝组织SOD，GSH-PX活性，提示APS单独或与TG联用具有提高抗氧化物酶活性的作用.关于APS，TG的抗衰老作用机制及剂量对抗衰老的影响等还有待于进一步研究阐明. 

　［参 考 文 献］

    ［1］ 葛斌，许爱霞，杨社华.黄芪多糖抗衰老作用机制的研究［J］. 药学杂志 ，2004，24（10）:610.

    ［2］ 朱建明.人参皂甙的抗衰老作用研究进展［J］. 中医药信息 ，1998，2:18.

    ［3］ 张善玉，朴惠顺，申英爱.黄芪多糖与人参总皂苷联用 的免疫调节作用初步研究［J］. 中国药房 ，2005，16（21）:1620.

    ［4］ 杨勇杰，姜瑞芝，陈英红，等.猴头多糖HEP-2化学成分研究［J］. 天然产物研究与开发 ，2004，16（3）:194.

　［5］ Mecocci P，Fano G，Fulle S，et al..Age-dependent in-creases in oxidative damage to DNA，lipids，and proteins in human skeletal muscle［J］.Free Radic Med，1999，26（3）:303.

    ［6］ 张延英，李广远，吴红彦，等.锁阳蜜对衰老模型小鼠血清SOD、MDA及IL-2的影响［J］. 甘肃中医学院学报 ，2003，20（4）:12.

    ［7］ 白云，苏云明.健脑益寿胶囊对体内脂质过氧化作用影响的实验研究［J］. 中医药信息 ，2006，23（4）:59.

    （1.延边大学护院;2.延边朝医医院;3.延边大学药学院:吉林延吉133000）