肾气丸对衰老大鼠小肠CD4+T细胞、CD8+T 细胞的影响
2.4 细胞计数在olympua BH-2型显微镜下观察,拍照,并对每张切片随机取5个(400×)视野下,以100个上皮细胞所含阳性细胞进行计数,结果以±s表示,利用 SPSS13.0软件进行数据分析,组间比较采用t检验。
3 结果
3.1 一般情况的观察结果正常组大鼠精神好,行动敏捷;毛发光泽、顺滑;皮肤弹性好;大便成形,呈黄褐色,无腥臭。模型组大鼠体重明显下降、消瘦;倦怠、嗜卧;大便溏泻,肛周有污物;大鼠蜷缩、聚堆;食欲明显下降;大鼠毛色干枯不荣。实验组大鼠上述表现较模型组有良性逆转,与正常组大鼠比较,外形基本无变化,活动频率如常,摄食尚可,大便为深褐色软便。
3.2 CD4+T细胞、CD8+T 细胞计数结果模型组较对照组,上皮及固有层内CD4+T细胞计数有显著差异(P<0.05);高剂量组或低剂量组与对照组比较,上皮和固有层内CD4+T细胞也有显著差异(P<0.05);高剂量组与低剂量组比较无明显差异(见表1)。CD8+T 细胞在模型组和实验组与对照组比较,均无明显差异(P>0.05)(见表2)。A-模型组 B-实验组 C-对照组图2 空肠内CD8+T细胞(免疫组织化学SP法,400×)表1 不同小肠上皮和固有层内CD4+T细胞数(个/100个上皮细胞表2 不同小肠上皮和固有层内CD8+T细胞数(个/100个上皮细胞
4 讨论
在现代医学众多衰老的学说中,衰老的免疫学理论占有重要地位。资料表明,衰老动物的免疫器官萎缩和免疫细胞数量下降[7],但有关衰老对肠黏膜免疫细胞的研究,目前还未见报道。本组资料显示衰老对大鼠小肠黏膜T细胞亚群有一定的影响,模型组与正常对照组比较,小肠黏膜内CD4+T细胞明显减少,提示衰老可降低小肠黏膜的局部免疫功能。
中医认为肾虚证为衰老的主要原因/机制。肾虚,则必然引起机体正气的不足,影响机体的代谢能力,造成清除有害氧化物自由基的能力下降,出现病理产物的积累,致细胞老化,组织退行性病变等。本文以中医治肾虚证为切入点,以肾气丸为工具药,从黏膜免疫的角度,开展了中医抗衰老的实验研究。实验表明,肾气丸可对D-半乳糖所致亚急性衰老大鼠的小肠黏膜免疫指标施加影响,明显提高衰老大鼠小肠黏膜内CD4+T细胞的数量,从而提示肾气丸可提高大鼠肠黏膜局部免疫功能,延缓衰老。
【参考文献】
[1] 姚建平. 虚实与衰老[J]. 辽宁中医杂志,2004,31(6):458.
[2] 闫润红,李瑞.试论肾虚与衰老[J].山西中医学院学报,2006,17(5):8.
[3] 江 明,李 棋,李庆阳,等.老年脾、肾虚与细胞免疫关系研究[J] .江西中医学院学报,2000,12(3):123.
[4] 史进方,顾国浩.免疫衰老及其免疫学预警指标[J].现代免疫学,2005,25(4):347.
[5] Brink TC, Regenbrecht C, Demetrius L, et al. Activation of the immune response is a key feature of aging in mice[J].Biogerontology. 2009,10(6):721.
[6] 邹移海,徐志伟,苏钢强,等.21世纪高等医学院校教材实验动物学[M],北京:科学出版社,2004:125.
[7] 谢红林,方艳辉,陈志杰,等.衰老大鼠细胞免疫功能的变化及中药天年饮的延缓衰老作用[J].时珍国医国药,2007,18(10):2393.