秋茄多糖的提取及其组成的研究
【摘要】 目的该文对红树植物秋茄中多糖的提取及其组成进行了研究。方法秋茄叶经热水浸提、Sevage法脱蛋白等方法得到多糖;经完全酸水解,糖腈乙酸酯衍生化,并用红外光谱仪、气质联用仪对其结构和组成进行了研究。结果秋茄多糖由D-阿拉伯糖和葡萄糖组成,它们的摩尔比为1∶2。结论秋茄多糖为杂多糖。
【关键词】 秋茄; 多糖; 提取; 组分
近年来,国际上对药用红树植物的化学成分及其药理研究表明,红树植物具有抗艾滋病、抗肿瘤、抗氧化等活性[1]。秋茄为红树科秋茄属植物,本属只有一种,即为秋茄。秋茄因其特殊的生长环境,在其化学成分和生理活性方面都具有很多特殊性。至今为止的秋茄研究资料表明,对秋茄化学成分和生理活性的研究在世界范围内较为分散,缺乏较深入或系统地研究。虽然人们现已从秋茄中分离出多个鞣质类化合物,但是关于其生物活性方面的研究并没有多少报道。本实验对红树植物秋茄中的多糖进行提取并对其组成进行了研究。
1 材料与仪器
1.1 原料秋茄叶(采自湛江东海岛),洗净剪碎,置于通风处阴干,备用。
1.2 试剂95%乙醇;无水乙醇;氯仿;正丁醇;丙酮;无水乙醚;硫酸;碳酸钡;吡啶;盐酸羟胺;乙酸酐,以上试剂均为分析纯。
1.3 仪器E-5299旋转蒸发仪(巩义市予华仪器有限责任公司);SHB-B95A型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);GCMS-QP2010气相色谱质谱连用仪(岛津制作所);HH-S2系列恒温水浴锅(江苏省全坛市环宇科学仪器厂);FTIR-8400S型红外光谱仪(日本岛津公司);ESJ120-4型电子天平(沈阳市龙腾电子有限公司);202-2型干燥箱(上海市实验仪器总厂);GSP-84-02型磁力恒温搅拌器(山东电讯七厂)。
2 方法
2.1 多糖提取称取粉碎、干燥好的秋茄叶150 g,加入1 500 ml蒸馏水,超声处理20 min后加热到90 ℃,热水浸提3次,过滤,合并,得棕色滤液。用旋转蒸发仪浓缩滤液至50 ml,抽滤,滤液中加入3倍其体积的95%乙醇沉淀多糖,于冰箱放置过夜,得棕色絮状物,离心收集沉淀。
2.2 Sevag法去蛋白[2]Sevag试剂的配制:用氯仿与正丁醇以4∶1混合。上述沉淀加水溶解,即得棕色溶液,加入溶液1/3倍体积的Sevag试剂,剧烈振荡至无白色絮状物析出,然后离心,除去水相与有机相交界处的变性蛋白,剩余液体再加入200 ml无水乙醇,充分振荡摇匀,于冰箱静置24 h,得棕色絮状物。离心收集沉淀,沉淀经无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤两次脱去脂肪和色素,干燥,得棕色粗多糖1.1 g。
2.3 红外光谱法(IR)鉴定多糖采用KBr压片制样,在4 000~400 cm-1区间内用红外光谱仪扫描IR吸收。