脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定

来源:岁月联盟 作者: 时间:2015-05-10

  2.2.2检测波长的选择取按2.2.1项下方法制备的3种溶液,分别在200~600nm范围内进行波长扫描,结果显示对照品溶液和供试品溶液均在270nm处有最大吸收,阴性溶液在270nm处无吸收,结果见图1。

  2.2.3色谱条件[8]色谱柱:Luna Cl8(2) 100R(150mm ×4.6mm,5μm),流动相:乙腈—水(体积比为30∶70),流速:1.0mL/min,检测波长:270nm。以淫羊藿苷计算理论塔板数不低于6000。

  2.2.4专属性试验在上述色谱条件下,分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液10μL进样测定,记录色谱图,淫羊藿苷峰保留时间为5.89min,阴性样品在淫羊藿苷峰位置无干扰峰,供试品中淫羊藿苷与其他组分分离完全,分离度为2.09,理论板数以淫羊藿苷峰计算为6057,结果见图2。

  2.2.5标准曲线绘制精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10、12、14μL ,按2.2.3项下色谱条件测定,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,进行线性回归,回归方程:Y=132307X-10726,r=0.9999,结果表明淫羊藿苷在6.9×10-2~4.83×10-1μg呈良好的线性关系。

  2.2.6精密度试验精密吸取对照品溶液10μL,连续进样5次,测定淫羊藿苷峰面积,结果峰面积积分值sR为0.95%(N=5),表明精密度良好。

  2.2.7重复性试验取同一批号样品(批号:20080819)5份,按供试品溶液制备方法制备,进样10μL测定,淫羊藿苷含量均值为3.96mg/粒,sR为2.7%,表明重复性良好。

  2.2.8稳定性试验取2.2.1.2项下供试品溶液分别于0、4、8h进样,测定淫羊藿苷峰面积,结果峰面积积分值sR为0.59%(N=3),表明供试品溶液在8h内稳定。

  2.2.9加样回收试验精密称取5份已知含量的样品(批号:20080819)约0.05g,精密加入淫羊藿苷对照品溶液1mL(0.49mg/mL),按2.2.1.2项下方法制备供试品溶液,进样10μL测定,计算回收率,结果见表3。表3淫羊藿苷加样回收率试验(略)

  2.2.10样品测定精密称取3批样品各0.1g,按2.2.1.2项下方法制备供试品溶液,进样10μL,依法测定淫羊藿苷的峰面积,照外标一点法计算含量,结果见表4。表4脑忆源胶囊中淫羊藿苷含量测定(略)

  3讨论

  目前改善记忆功能的国产保健食品中含中药或植物药组方者较少,仅舒脑口服液和脑轻松胶囊涉及,功效成分为总黄酮,但其制剂总黄酮标示含量均在100mg/kg以下。本试验测得脑忆源胶囊中总黄酮含量达11440mg/kg,淫羊藿苷含量达8520mg/kg。按剂量服用,每天总黄酮摄入量可达到60mg左右,为产品的药效学研究奠定了辅助改善记忆功能的物质基础。总黄酮的含量测定方法报道很多,目前收载入相关国家标准的有3种方法:文献[6]中收载的2种方法和药典[7]中收载的方法。有学者[1]比较了上述3种方法对总黄酮含量测定的影响,表明文献[6]中收载的“检验二法”最合理、简便,因此本实验选择该法测定总黄酮的含量。

  淫羊藿苷测定预试验中, 对供试品溶液、阴性对照溶液、对照品溶液分别进行紫外扫描,结果显示对照品和供试品均在270nm处有最大吸收,而阴性对照溶液在270nm处无吸收,因此选择270nm作为检测波长。以不同比例的乙腈—水为流动相进行测定,确定乙腈—水的体积比为30∶70,淫羊藿苷峰型良好,各组分分离效果好,阴性样品无干扰。

  本研究所建立方法可准确测定脑忆源胶囊中黄酮类成分的含量。

【参考文献】
    [1]陈永刚,刘晓涵,区计明,等.不同测定方法测定淫羊藿中总黄酮含量的比较[J].食品科技,2009(5):291.

  [2]沈自尹.淫羊藿总黄酮延缓衰老的研究[J].世界科学技术——中医药现代化,2005, 7 (1):12.

  [3]黄琳娟,林颖,田庚元,等.枸杞子中免疫活性成分的分离、纯化及物理化学性质的研究[J]. 药学学报,1998,33(7):512.

  [4]肖凤霞,林励.巴戟天补肾壮阳作用的初步研究[J].食品与药品,2006,5 (8):45.

  [5]刘晓涵,陈永刚,林励,等.不同产地巴戟天中糖类成分HPLCELSD指纹图谱研究[J].中草药,2009,40(10):1641.

  [6]黄雨三.保健食品检验与评价技术规范实施手册[S].北京:清华同方出版社,2003:1082,1242.

  [7]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:化学工业出版社,2005:229.

  [8]钟涧.高效液相色谱法测定龟鹿补肾胶囊中淫羊藿苷的含量[J].广东药学院学报,2004,20(4):625.

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