地高辛标记探针检测重组人干扰素α2b中DNA残留量的研究
图2 探针标记效率检测图（略）
Figure 2 Detection of probe labeling efficiency
2．3 重组人干扰素α2 b半成品中外源性DNA残留量的检测
用标记的探针检测干扰素α2 b半成品中DNA的残留量，结果见图3。结果表明，1/10人份剂量的2批半成品中外源性DNA残留量均小于1 ng,因此1人份剂量的半成品中DNA残留量小于10 ng。
2．4 重现性试验
按上述检测方法，对2批重组人干扰素α2 b半成品重复测定3次，3次的测定结果一致，均为1人份剂量的半成品中DNA残留量小于10 ng，则表明该方法的重现性较好。
A1～A3: The content of standard DNA were 0.1,1,10 ng/100μL; A4: Negative control; A5: Blank control; B1～B2: The two batches of semi-finished products
图3 注射用重组人干扰素α2b半成品中外源性DNA残留量检测图（略）
Figure 3 Detection of residual DNA in semifinished products of recombinant human interferon α2b for injection
3 讨论
以往DNA残留量的检测大都采用同位素法，因此操作人员会受到放射性同位素辐射的危害。地高辛标记探针法则避免了放射性的危害，且探针法操作较简便，也避免了同位素检测时包片曝光等诸多环节导致的实验结果误差［5，6］。在探针法中总DNA的提取可用不携带表达基因的细菌，也可用重组的工程菌，提取的总DNA中不应被RNA或蛋白污染，否则将会影响到紫外定量的准确性，同时也会影响到标记探针的灵敏度和特异性。在杂交过程中，杂交液的pH值对反应的灵敏度影响较大。通过本文的研究发现，地高辛标记探针法测定DNA的残留量有着特异性高、操作简便和重现性好的特点，可以用于注射用重组人干扰素α2b生产过程中的质量监控,从而保证其安全性,符合国家制定的相关质量控制标准,也可以推广至其他重组大肠杆菌生物制品中DNA残留量的检测。
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