雌二醇鼻腔喷雾剂大鼠体内的药动学研究
3 结果
3．1 大鼠体内药物浓度时间曲线
各样品大鼠鼻腔及静脉注射给予E2后的平均血药浓度时间曲线见图1-4。
3．2 绝对生物利用度
计算各鼻腔给药组E2绝对生物利用度，结果见表1。
图1 雌二醇鼻腔喷雾剂鼻腔给药后大鼠体内血药浓度时间关系曲线图（略）
Figure 1 Plasma concentrationtime curves in rats nasally administered with estradiol nasal spray at the doses of 0. 16, 0.48, and 1.60 mg·kg-1
图2 雌二醇环糊精包合物溶液鼻腔给药后大鼠体内血药浓度时间关系曲线图（给药剂量：0.16 mg·kg-1）（略）
Figure 2 Plasma concentrationtime curves in rats nasally administered with estradiolRAMEB solution at the dose of 0.16 mg·kg-1
图3 雌二醇乙醇溶液鼻腔给药后大鼠体内血药浓度时间关系曲线图（给药剂量：0.16 mg·kg-1）（略）
Figure 3 Plasma concentrationtime curves in rats nasally administered with estradiolethanol solution at the dose of 0.16 mg·kg-1
图4 静脉注射雌二醇溶液后大鼠体内血药浓度时间关系曲线图（给药剂量：0. 16 mg·kg-1）（略）
Figure 4 Plasma concentrationtime curves in rats intravenously injected with estradiolethanol solution at the dose of 0.16 mg·kg-1
表1 鼻腔给药后各制剂的主要药动学参数（略）
Table 1 Pharmacokinetic parameters after nasal administered with different preparations of estradiol
由于E2鼻腔喷雾剂的体内过程复杂，药时曲线无法按现有的数学模型进行处理，因此，采用梯形法计算AUC，并经统计矩处理计算MRT等药动学参数。检验结果显示，E2鼻腔喷雾剂0.16 mg·kg-1剂量组的Cmax与E2鼻腔喷雾剂1.60 mg·kg-1剂量组和E2RAMEB包合物溶液组之间差异有显著性，AUC与E2鼻腔喷雾剂0.48、1.60 mg·kg-1剂量组和E2乙醇溶液剂组间差异有显著性（P<0.05）。经计算3个剂量组的E2鼻腔喷雾剂的绝对生物利用度分别为86.87％、65.83％和48.99％， E2RAMEB包合物溶液组和E2乙醇溶液剂组的绝对生物利用度分别为56.44％和24.38％。E2鼻腔喷雾剂0.16和0.48 mg·kg-1剂量组的绝对生物利用度均高于单独鼻腔给予E2RAMEB包合物溶液，从而说明鼻腔给予E2鼻腔喷雾剂提高了E2鼻腔吸收的生物利用度。
4 讨论
4．1 动物模型的选择
选择合适的动物模型对于确定鼻腔给药后药物的有效性非常重要。大鼠等哺乳动物的嗅细胞散在分布于整个鼻腔中，与人体嗅黏膜分布于鼻腔顶部不同，并且嗅细胞数量多，嗅黏膜占鼻黏膜总表面积的比例也高于人体，所以大鼠鼻腔给药后的实验结果只能作为人体的一种参考。虽然不能直接将大鼠的研究数据推之于人，但可认为其转运趋势是一致的。
4．2 研究方法的建立
大鼠鼻腔给药的研究方法是Harai等于1981年建立的［7］。为了将药物完全保留在鼻腔中，Harai等采用胶黏剂聚α氰基丙烯酸酯封堵鼻腭通道，减少药物向口腔的清除。由于胶黏剂封堵鼻腭通道时易渗入大鼠鼻腔，瞬间黏合形成胶状膜，影响药物的鼻黏膜吸收，且对动物的损伤大，故本研究采用给药后立即结扎食管来代替胶黏剂封堵，操作简便且可有效防止药液吞咽。
4．3 吸收结果的讨论
雌二醇的乙醇溶液鼻腔给药并没有观察到吸收相，其可能的原因是乙醇作为一种渗透促进剂能够显著的提高药物对于鼻腔黏膜的通透性，增加药物对于黏膜的透过速率；其次，鼻腔纤毛的摆动运动也会将一部分的药物清除；即在测定时间点前，药物已经达到了吸收的峰值，因此在第一个时间点开始并未观察到药物的吸收相。
【参考文献】
［1］ GENAZZANI A R, GAMBACCIANI M. HRT in the third millennium［J］.Maturitas,2001,38(1): 49-55.
［2］ O′CONNELL M B. Pharmacokinetic and pharmacologic variation between different estrogen products ［J］.J Clin Pharmacol,1995,35:18-24.
［3］ FRASER D I，PARSON A, WHITEHEAD M I,et al. The optimal dose of oral norethindrone acetate for addition to transdermal estradiol：a multicenter study［J］.Fertil Steril,1990,53:460-468.
［4］ 郑彩虹，梁文权.阴道内给药系统发展现状［J］.中国现代应用化学杂志，2002,19(6):465-469.
［5］ YOON Y, WESTERHOFF P, SNYDER S A,et al. HPLCfluorescence detection and adsorption of bisphenol A, 17βestradiol, and 17αethynyl estradiol on powdered activated carbon［J］. Water Res,2003,37(14):3530-3537.
［6］ ALKHARFY K M, FRYE R F. Sensitive liquid chromatographic method using fluorescence detection for the determination of estradiol 3and 17glucuronides in rat and human liver microsomal incubations: formation kinetics［J］.J Chrom B,2002,774:33-38.
［7］ HIRAI S, YASHIKI T, MIMA H. Effect of surfactants on the nasal absorption of insulin in rats ［J］.Int J Pharm,1981,9:165-172.