HPLC法测定阿莫西林颗粒剂的含量及有关物质
表1 线性梯度洗脱（略）
Table 1 Gradient elution
2.3.2 溶液的制备 对照品溶液：精密称取阿莫西林对照品，加流动相A制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。
供试品溶液：取装量差异项下的内容物，研细，精密称取粉末适量，加流动相A溶解并稀释成每1 mL含2 mg的溶液，滤过，取续滤液，即得。
A.对照品;B.样品;C.空白辅料;1.阿莫西林
图3 阿莫西林颗粒剂有关物质测定的HPLC色谱图（略）
Figure 3 HPLC of amoxicillin and impurities
2.3.3 专属性试验
将供试品在60 ℃温度下放置10 d，于第10天取样，按“2.3.2”项方法制备溶液，进样测定。结果表明本品经高温加速实验后，杂质总数和总量均明显增加，主成分与各种分解产物完全分离。将供试品在相对湿度92.5%（KNO3饱和溶液），温度35 ℃下放置10 d，于第10天取样，按“2.3.2”项方法制备溶液，进样测定。结果表明本品经高湿加速实验后，杂质总数和总量均有所增加，主成分与各种分解产物完全分离。色谱图见图4。
A.高温降解;B.高湿降解;1 阿莫西林
图4 阿莫西林专属性试验HPLC色谱图（略）
Figure 4 HPLC of amoxicillin for selectivity test
2.3.4 线性关系考察 精密称取阿莫西林对照品适量，用流动相溶解并稀释成含阿莫西林0.049 7、0.024 8、0.012 4、0.006 2、0.001 2 mg/mL的溶液，按“2.3.1”项下的色谱条件进行测定，以质量浓度（ρ）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，得线性回归方程为A=29328ρ-6.6772，r=0.999 8（n=5）。结果表明，阿莫西林质量浓度在0.049～0.001 2 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好。
2.3.5 重复性试验 取同一批样品（批号17374）6份，按“2.3.2”项方法制备溶液，进样测定，计算得单个最大杂质含量为0.53%，RSD为2.1%，总杂质含量为1.2％，RSD为2.0%（n=6），表明分析方法重复性良好。
2.3.6 检测限 在“2.3.1”项的色谱条件下，当阿莫西林对照品进样质量浓度为0.1 μg/mL时，记录的色谱峰峰高约为基线噪音3倍，根据进样量20 μL计算，得阿莫西林的检测限为2 ng。
2.4 样品测定
按拟定的方法测定4批样品中阿莫西林的含量，结果见表2。
表2 含量与有关物质测定结果 （略）
Table 2 Contents and related substance of amoxicillin
3 讨论
3.1 取3批样品同时采用原标准的UV法和本文的HPLC法进行含量测定，结果见表3。结果表明HPLC法测得的含量均小于UV法，可能是因为HPLC法选择性好，能将阿莫西林与相似结构杂质分离，因此表明采用HPLC法可更专属、快速地测定阿莫西林颗粒剂中阿莫西林的含量。
表3 2种含量测定方法的比较（略）
Table 3 Contents of amoxicillin by two methods
3.2 分别对刚生产及存放1年后产品进行有关物质考察比较，结果单个最大杂质含量由0.23％增加为0.53％，总杂质含量由0.44％增加为1.14％，说明对阿莫西林颗粒有关物质的检查是非常必要的。
3.3 分别选用色谱柱Thermo ODS C18 （200 mm×4.6 mm，5 μm）、Tigerkin C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）、SHIMADZU ODS C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm），取同一批样品分别进行试验，结果3种色谱柱理论塔板数均达到2 000以上，主峰与各杂质的分离度均符合要求，测定结果重现性好。
3.4 本文建立了专属、灵敏、快速、准确的阿莫西林颗粒剂的含量测定及有关物质检查的方法，可以更好的控制该药品的质量。本文结果提示这种主要用于儿童的药品，对其进行有关物质检查十分必要。
【参考文献】
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