HPLC法测定羧甲司坦无糖口服溶液中羧甲司坦的含量及有关物质
羧甲司坦+半胱氨酸溶液：用对照品溶液制成每1 mL含半胱氨酸0.5 mg的混合溶液。
酸水解产物：量取本品2 mL,置50 mL量瓶中,加0.1 mol·L-1HCl溶液10 mL,加水稀释至刻度,摇匀。
碱水解产物：量取本品2 mL,置50 mL量瓶中,加0.1 mol·L-1NaOH溶液10 mL,加水稀释至刻度,摇匀。
热分解产物：取本品1支，置沸水中加热10 min，冷却，量取2 mL,置50 mL量瓶中，加水稀释至刻度,摇匀。
强光破坏产物：取本品，在(4500±500)Lx下光照2 d后，量取本品2 mL,置50 mL量瓶中, 加水稀释至刻度,摇匀。
氧化降解产物：量取本品2 mL,置50 mL量瓶中,加过氧化氢0.1 mL，加水稀释至刻度,摇匀。
阴性对照液：取口服溶液的空白辅料适量，用水制成每1 mL含羧甲司坦1 mg的辅料溶液。
取上述溶液分别进样检测。色谱图见图2，有关物质测定结果见表2。
表2 有关物质测定结果（略）
Table 2 Results of the related substances determination
图2 降解产物的色谱图（略）
Figure 2 HPLC chromatogram of degradation products
2.2.3 最低检测限 羧甲司坦的最低检测限为 8. 27 ng。
2.2.4 不同pH值对产品稳定性的影响 用磷酸盐缓冲溶液配制pH值分别为5.5、5.9、6.5、7.0、7. 9、8.1的供试品溶液，按上述方法测定，结果见表3。
表3 不同pH值的试验结果（略）
Table 3 Results of stability at various pH values
3 讨论
3.1 羧甲司坦为强酸性化合物，分离强酸性化合物常用的离子对试剂是烷剂磺酸盐，经试验：流动相中以0.05%己烷磺酸钠为离子对时，保留时间约为5 min，杂质可达到基线分离，因此选择己烷磺酸钠作为离子对试剂。
3.2 从羧甲司坦对照品的二极管阵列检测器紫外扫描图看出，羧甲司坦有紫外末端吸收，因此检测波长选择215 nm。
3.3 有关物质专属性研究的图谱提示：（1）半胱氨酸是羧甲司坦合成的前体，羧甲司坦口服溶液在酸、碱、热、强光、氧化条件下被破坏产生的杂质并不是水解产物半胱氨酸；（2）本品在强酸、强碱性、热、强光、氧化破坏条件下，羧甲司坦口服溶液均产生保留时间为11.5 min的主杂质峰，推测可能为羧甲司坦的双分子聚合物，有待进一步证实。
3.4 pH值对供试品稳定性的影响试验结果表明：室温时，pH值对供试品溶液的含量和有关物质的影响不大；供试液经100 ℃加热15 min后，当pH值＞7.4时，有关物质明显增加，故羧甲司坦口服溶液生产制备时不宜采用高温消毒。
3.5 中国药典收载的羧甲司坦口服溶液（含糖型），有pH值降低现象，而无糖型产品经18个月的稳定性考察，溶液的pH值较稳定。
3.6 经方法学验证，本法简便、准确,灵敏度高，重复性好，可用于羧甲司坦无糖口服溶液的含量测定和有关物质检查。
【参考文献】
［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典2005年版：一部［S］.北京:化学工业出版社,2005:817.
［2］ 陈秀琳,郑小力.HPLCELSD法测定羧甲司坦颗粒中羧甲司坦的含量［J］.中国药品标准,2006,7（3）:62-64.
［3］ 毕惠嫦，钟国平，汤铮，等.高效液相色谱法测定人血浆中羧甲司坦浓度［J］.中国医院药学杂志,2005,25(9):828-830.
［4］ 赵雪梅,黄秀明.反相离子对色谱法测定羧甲司坦片和口服溶液中羧甲司坦的含量［J］.中国药品标准,2007,8（2）:60-63.