HPLCELSD法测定甘草中3种甘草皂苷的含量
2.6 重复性试验
配制同一产地(甘肃陇西)供试品溶液6份，分别进样测定，测得甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B的含量平均值分别为1.21%、3.21%、1.28%，RSD分别为1.40%、0.89%、1.23%，表明重复性较好。
2.7 回收率试验
精密称取已知含量同批药材粉末6 份，每份约0.25 g，分别精密加入甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B对照品溶液适量，按“2.2.2”项下制备供试品溶液，进样测定，计算回收率，结果甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B的平均回收率分别为100.6%、100.8%、99.87%，RSD分别为1.9%、2.0%和1.7%(n=6)。结果见表1～3。表1 甘草皂苷G2回收率试验结果表2 甘草酸铵回收率试验结果表3 乌拉尔甘草皂苷B回收率试验结果
2.8 样品测定结果
精密吸取供试品溶液20 μL，注入液相色谱仪，重复3次，得甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B峰面积平均值，代入回归方程计算，求得不同产地甘草药材样品中甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B的含量，结果见表4。
3 讨 论
3.1 流动相系统的选择 曾分别用水乙腈磷酸，乙腈1%醋酸溶液，乙腈2%醋酸溶液，甲醇0.2 mol/L乙酸铵水溶液冰乙酸，水(0. 01 mol/L乙酸) 乙腈等不同比列的几种流动相体系进行实验，结果表明甲醇0.2 mol/L乙酸铵水溶液冰乙酸(体积比65∶34∶1)溶剂系统分离效果较好，各峰的保留时间适中，样品分析时间在18 min内。
3.2 ELSD检测器参数的设定 研究发现载气流速和漂移管的温度对ELSD的检测性能有较大影响，在仪器规定的参数范围内经反复实验，最终确定ELSD检测器的参数为雾化气体流速2.8 L/min，漂移管温度为110 ℃。
3.3 供试品溶液的制备 在样品处理过程中，曾比较了以水、不同比例的乙醇和甲醇、流动相为溶剂，回流提取、索氏提取和超声提取，结果表明以流动相为溶剂，超声提取，样品中甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B提取完全，且操作简便。
3.4 中国药典(2005年版)采用HPLC法测定甘草皂苷类成分中的甘草酸和甘草黄酮类成分中的甘草苷，以控制甘草的质量。本文采用HPLC法测定甘草皂苷中的3种成分，可获得甘草皂苷类化学成分的更加明确的结果，可为更全面地控制甘草质量提供科学、有效的检测方法。
3.5 本研究表明，我国不同产地的甘草中均含有甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B，因产地不同，这3种皂苷的含量有较大差别，其中，以宁夏盐池产甘草药材中甘草皂苷G2、甘草酸铵、乌拉尔甘草皂苷B的含量最高。本实验结果具有简便、快速、重现性好的特点，可作为甘草药材质量控制的依据。
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