滋阴明目丸微生物限度检查方法的建立

　　2.4  大肠菌群的验证试验

    试验组：取1∶10、1∶100的供试液1 mL,分别接入10 mL胆盐乳糖发酵培养基中,分别加入大肠埃希菌混悬液1 mL, 30～35 ℃培养24 h,观察结果。阴性对照组：除菌液为金黄色葡萄球菌1 mL,方法同试验组。阳性对照组：除不加供试液,其他操作同试验组。结果见表2。表2  大肠菌群验证试验结果（略）

　　2.5  控制菌验证试验

    试验组：取批号为060402的1∶10供试液10 mL,加入大肠埃希菌液1 mL,接入100 mL胆盐乳糖培养基中,35 ℃培养24 h；取上述培养物0.2 mL,接种至5 mL MUG培养基的试管中,35 ℃培养24 h；观察后,沿管壁加入数滴靛基质试液,观察结果。阴性菌对照组：除菌液为金黄色葡萄球菌1 mL,方法同试验组。阳性对照组：除不加供试液,其他操作同试验组。结果见表3。表3  大肠埃希菌验证试验结果（略）

    滋阴明目丸3次平行试验,试验组都检出大肠埃希菌,阴性菌对照组都未检出金黄色葡萄球菌,表明滋阴明目丸的控制菌检查方法按常规法,经方法学验证试验成立。

　　2.6  样品检验结果

    取滋阴明目丸3批供试品(070305、070419、070821)稀释液按常规法进行细菌、霉菌及酵母菌计数、控制菌检查,经检验符合规定。

　　3  结论

    通过方法学验证试验得出：滋阴明目丸可按常规法进行微生物限度检查；进行霉菌及酵母菌计数和控制菌检查,按培养基稀释法(0.2 mL/皿)进行细菌计数。

　　4  讨论

    由于中成药是含有多种成分的复合制剂,作用机理并不十分明确,其中任何成分具有抑菌作用均可影响微生物限度检查的准确性。因此,在研究滋阴明目丸微生物检查方法时,以2005年版《中华人民共和国药典》作为依据,并参考文献[2-3]将5种阳性对照菌的回收率作为评价所采用的方法是否适合于本品种。
  
　　采用常规法检查滋阴明目丸的细菌、霉菌及酵母菌,回收率显示,本品对大肠埃希菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉均无抑制性。采用常规法检查滋阴明目丸的控制菌,结果符合药典规定。

【参考文献】
  　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.附录70.

　　[2] 中国药品生物制品检定所.中国药品检验标准操作规范[M].北京：中国医药科技出版社,2005.326－328.

　　[3] 马绪荣,苏德模.药品微生物学检验手册[M].北京：科学出版社,2000.65.