HPLC法测定五黄膏中没食子酸的含量

【摘要】  目的 建立五黄膏中没食子酸的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法,以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为270 nm。结果 没食子酸的线性范围为0.189 2～1.892 μg(r=0.999 9),平均回收率为99.2%,RSD=1.22%。结论 本法高效、快速、灵敏,可作为五黄膏质量控制的有效方法。

【关键词】  五黄膏;没食子酸;高效液相色谱法;含量测定

　　Abstract：Objective To set up a method for determining the content of gallic acid in Wuhuang Gao. Methods HPLC separation was performed by gradient eluting with methanol-0.1% phosphoric acid at the flow rate of 1.0mL/min. The detection wavelength was 270 nm. Results The linear range of gallic acid was 0.189 2～1.892 μg, r=0.999 9. The average recovery rate was 99.2%, RSD=1.22%. Conclusion The method is highly effective, quick and sensitive, and suitable for quality control of Wuhuang Ointments.

　　Key words：Wuhuang Ointments;gallic acid;HPLC;content determination

　　五黄膏是由五倍子、黄芩、冰片3味中药组成的复方制剂,具有清热解毒、消肿止痛、化瘀散结、除湿收敛之功效[1],临床上用于治疗麦粒肿及疖、甲沟炎。五倍子为方中主药,没食子酸为其主要有效成分。为有效控制产品质量,笔者建立了五黄膏中没食子酸含量的高效液相色谱(HPLC)测定法。

　　1 仪器与试药

　　岛津高效液相色谱仪,二元梯度泵,SPD-M20A检测器, SIL-20AC自动进样器,CTO-20A柱温箱,LC-Solution化学工作站。

　　没食子酸对照品(批号110831-200302,纯度为99.1%)由中国药品生物制品检定所提供;五黄膏(批号060832、060833、060834、060835、060836、060837)由北京双吉制药有限公司提供。甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　SHISEIDO CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按表1中的规定进行梯度洗脱。检测波长为270 nm,流速1.0 mL/min,进样量10 ?L。表1 梯度洗脱表

　　2.2 空白试验

　　按处方中药味比例,配制不含五倍子的群药,按其工艺制成空白制剂(由北京双吉制药有限公司提供),再按供试品溶液的制备方法制备并测定,色谱图见图1。表明阴性样品溶液在与没食子酸对照品相同保留时间处未显色谱峰,故认为无干扰。

　　2.3 对照品溶液的制备

　　精密称取没食子酸对照品适量,加50%甲醇制成每1 mL含60 ?g的溶液,作为对照品溶液。