附子配伍贝母对大鼠心、肝、肾脏毒性的实验研究

　　3 结果

　　3.1 体质量及脏器指数(见表1)从表1可见，体质量增长率、肝脏指数各间均无显著差异(P>0.05)，D组心脏指数显著高于B、C组(P<0.01)，D组肾脏指数明显高于C组(P<0.05)。

　　表1 各组体质量增长率及心、肝、肾脏指数(±s)

　　3.2 形态学观察

　　3.2.1 心肌形态学见图1。对照组结构正常;附子组心肌间隙明显宽大，肌束细长，肌纤维粗细不等，少许区域肌浆有融合现象，间质中可见个别炎细胞浸润;贝母组心肌纤维之间间隙明显扩大，肌丝粗细不等，肌浆融合，间质出血，炎细胞浸润明显;附子+贝母组心肌肌束断裂，肌纤维结构消失，部分肌纤维融合，胞浆同质状，周边部蛋白液渗出，炎细胞浸润明显。

　　图1 各组心肌形态学改变(HE，400×)

　　3.2.2 肝脏形态学见图2。对照组结构正常;附子组肝小叶结构略显紊乱，肝索上细胞排列不规则，可见较多慢性炎症细胞浸润，肝细胞水肿，细胞核大深染，可见双核;贝母组汇管区可见大量炎细胞浸润，部分肝细胞变性;附子+贝母组大部分小叶结构正常，可见2～3个细胞体积大，核大深染，并可见双核肝细胞。

　　3.2.3 肾脏形态学 见图3。对照组结构正常;附子组肾近曲小管上皮细胞水肿，界限不清，小血管扩张充血，间质可见蛋白样水肿液，间质炎细胞浸润明显;贝母组肾小球数目减少，管腔扭曲不规则，间质灶性纤维化，结构紊乱，炎细胞浸润明显;附子+贝母组肾小管明显扩张，中央视野可见肾小球玻璃样变性，内有出血，周边部可见少许内皮细胞，间质炎细胞浸润明显。

　　图2 各组肝脏形态学改变(HE，400×)

　　3.3 生化指标结果见表2。与对照组相比，附子组LDH，BUN，Cr明显升高(P<0.05或P<0.01)。附子、贝母合用组与附子、贝母单用组相比，各检测指标与相应的比较组间均无明显差异(P>0.05)。

　　4 结论与讨论

　　脏器指数是反映药物对脏器影响，尤其是毒性的重要指标，测量脏器指数旨在从大体上寻求药物是否对心、肝、肾等重要器官有损伤。脏器指数增加表示脏器有充血、水肿、增生、肥大等变化，脏器指数下降则表示脏器有萎缩、退行性变化等[6]。生化检测选取LDH，CK，AST，ALT，BUN及Cr为检测项目，与大体标本形态学及显微镜下形态结构的变化相互印证，寻找药物毒性作用的靶器官。LDH、CK活性常用来反映心肌受损的程度。ALT为肝细胞损伤的灵敏指标，AST升高可提示心脏或肝脏受损。尿素是体内氨基酸分解代谢的最终产物之一，测定血液尿素的含量可以了解机体肾功能的状况，因1个尿素分子含有2个氮原子，可用BUN(血清尿素氮)表示尿素含量。Cr是肌酸代谢的终产物，由肾脏排出，它从肾小球滤过后不被肾小管再吸收，也不再分泌，其排出量较为恒定，不受食物中蛋白质含量的影响，测定血中Cr的含量能较准确的反映肾脏的排泄功能。血清BUN及Cr升高提示肾脏的排泄功能减退[7]。

　　本实验中附子组大鼠体质量增长率、脏器指数与对照组比较未发现显著性差异。镜下可见附子组心肌有明显病变，加之LDH活性升高，说明有心肌损伤;肝脏病理改变提示肝细胞有再生现象，但ALT、AST检测值与对照组相比无显著性差异，当肝炎损伤进入修复阶段时，即使尚残存较明显的肝脏病变，ALT及AST可正常[8]，因此可解释为本实验在第14天进行检测时附子造成的肝脏急性损伤还未修复，而生化检测值已恢复正常;肾脏损伤病理改变明显，加之BUN和Cr含量与对照组相比升高较明显，与病理变化具一致性。本实验结果可推测，附子单用有显著的心脏、肝脏和肾脏毒性，与向丽华等[6]报道一致。

　　图3 各组肾脏的形态学改变(HE，400×)

　　本实验中贝母单用时大鼠体质量增长率、脏器指数与对照组比较未发现显著性差异。LDH活性与对照组相比明显升高，其他生化指标变化均不明显。但形态学观察发现心肌、肝脏、肾脏均有明显病理改变，据此可推测贝母组也有一定的心、肝及肾脏毒性。关于贝母毒理研究相对较少，检索文献仅见毒性实验研究，对其毒性机制的研究未见报道[9，10]，有待于进一步探讨。

　　表2 各组血清生化指标(±s)

　　附子与贝母合用组大鼠体质量增长率、肝脏指数与对照组比较未发现显著性差异，心脏指数较其他3组均有显著性提高，与镜下观察到心肌形态学改变一致，且LDH活性较对照组升高，可相互印证;虽ALT及AST活性无变化，但形态学观察可提示有肝细胞有再生现象;肾脏指数较贝母单用有显著性差异，肾脏形态学观察病理改变明显，BUN及Cr含量较对照组明显升高，但与两药单用组差别不明显。因此附子、贝母配伍应用后心、肝、肾毒性较单用毒性明显提高。其机制可能与二药合煎后毒性成分乌头碱、次乌头以及新乌头碱的含量显著提高有关[11，12]，有待于进一步探讨。

【参考文献】
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　　[12] 翁小刚,聂淑琴,黄璐琦.HPLC测“半蒌贝蔹及攻乌”中乌头与其它诸药合煎前后次乌头碱的含量变化[J].中国药学杂志,2004,39(1):57.