小蓟的质量标准研究

【摘要】  目的建立小蓟药材的质量标准。方法运用薄层色谱法对小蓟中蒙花苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定蒙花苷的含量，色谱柱为Ultimate Column XB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水(51∶49)，检测波长为334 nm，流速1.0 ml·min-1，柱温25 ℃。结果薄层鉴别斑点清晰，重复性好;高效液相色谱法测定蒙花苷在0.006 58～2.964 μg之间峰面积与进样量呈良好线性关系(r=0.999 9)，平均加样回收率为100.7%，RSD为1.89%。结论该方法简单可行，重复性好，可作为小蓟药材的质量控制方法。

【关键词】  小蓟; 蒙花苷; 质量标准; 薄层色谱法; 高效液相色谱法

　　Abstract：ObjectiveTo establish the quality standard of Herba Cirsii. MethodsA TLC method was used for qualitative identification and at HPLC analysis was applied for quantitative determination of Herba Cirsii with linarin as the reference substances. The column was Ultimate Column XB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm), the mobile phase was the mixture of methanol-water(51∶49) with a flow rate of 1.0 ml·min-1, the UV detection wavelength was 334 nm and the column temperature was set at 25 ℃.ResultsThe TLC method was suitable for the identification of Herba Cirsii. A good linear relationship between the peak areas and injected amounts of linarin in the range of 0.006 58-2.964 μg , the average recovery was 100.7%(RSD=1.89%). ConclusionThe established method is simple and reproducible and can be used as quality control methods of Herba Cirsii.

　　Key words： Herba Cirsii; Linarin; Quality standard; TLC; HPLC

　　小蓟为菊科蓟属植物刺儿菜Cirsium setosum (Willd.) MB. 的干燥地上部分，全国各地均有分布，具有凉血止血、祛瘀消肿的功效，被临床广泛应用于治疗各种出血症及急慢性炎症、湿热证、疮疡等[1]。目前的化学成分研究和药理学研究揭示了黄酮类成分为小蓟止血、抗炎的主要活性成分[2, 3]。现行药典标准《中国药典》2005年版中，小蓟项下薄层鉴别以芦丁为指标进行定性鉴别，且无含量测定项，尚需修订与完善。根据作者前期的研究，蒙花苷在小蓟中的含量普遍较高，为主要的黄酮类成分，因此，本研究旨在建立以蒙花苷为指标成分的定性定量方法，为小蓟的质量控制提供参考。

　　1 仪器与试药

　　高效液相色谱仪(Agilent 1100型，包括四元泵、自动进样器、柱温箱、DAD检测器、Agilent 1100化学工作站，美国Agilent 公司);薄层色谱仪(Reprostar 3型，瑞士CAMAG公司);电热恒温水浴锅(DK-S24型，上海精宏实验设备有限公司);电子天平(Sartorius BT 124 S型，北京赛多利斯仪器系统有限公司);硅胶预制板(HSG，烟台江友硅胶开发有限公司)。蒙花苷对照品(由上海中药标准化研究中心提供，纯度>98%);甲醇为色谱纯，供试品制备用甲醇为分析纯，水为纯水。收集不同产地的小蓟药材共10批，经上海中药标准化研究中心吴立宏副教授鉴定为刺儿菜C. setosum的干燥地上部分。

　　2 方法与结果

　　2.1 薄层色谱鉴别取药材粉末1 g，加甲醇10 ml，超声提取30 min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取蒙花苷对照品，加甲醇制成每毫升含0.1 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液5 μl，对照品溶液10 μl，分别点于同一硅胶HSG薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-水(8∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。结果见图1。S-蒙花苷对照品 1~10.不同来源小蓟药材供试品图1 小蓟药材的薄层色谱图

　　2.2 含量测定

　　2.2.1 色谱条件Ultimate Column XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相为甲醇-水(51∶49);检测波长为334 nm;流速1.0 ml·min-1;柱温25 ℃。理论板数按蒙花苷峰计算应不低于2 000。对照品与供试品色谱图见图2。

　　2.2.2 对照品溶液的制备取蒙花苷对照品适量，精密称定，加80%甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，即得。

　　2.2.3 供试品溶液的制备取药材粉末(过3号筛)0.2 g，精密称定，精密加入80%甲醇60 ml，称定重量，80 ℃水浴加热回流3 h，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。A.对照品;B.供试品;1.蒙花苷图2 蒙花苷的高效液相图