脑得生软胶囊高效毛细管电泳指纹图谱研究

　　2.6 指纹图谱技术参数

　　2.6.1 共有峰的标定根据10个不同批次脑得生软胶囊供试品的检测结果，比较其电泳图谱，在25 min之内各色谱峰分离良好，结果见图2。以相对保留时间标定共有峰16个，并以8号峰为参照峰S(葛根素峰)，设定参照峰的峰面积为1，计算其他各共有峰相对保留时间和相对峰面积，结果其共有峰相对保留时间的RSD均小于2%，共有峰的峰面积比值的RSD均不超过5%。结果见表1～2。

　　图2 10个不同批次脑得生软胶囊指纹图谱叠加图

　　表1 10批样品共有峰相对保留时间　表2 10批样品共有峰相对峰面积

　　2.6.2 共有峰面积比值 计算非共有峰占总峰面积的比值，结果表明，其比值小于10%，符合指纹图谱的要求。

　　2.6.3 主要色谱峰的鉴别 在相同色谱条件下，测定葛根素对照品及芦丁对照品，并与样品指纹图谱中相应图谱峰进行比较，发现样品指纹图谱中8号峰的保留时间与葛根素色谱峰吻合，11号峰的保留时间与芦丁色谱峰吻合，故样品指纹图谱中8、11号峰鉴定为葛根素和芦丁。

　　2.7 相似度评价采用夹角余弦法，计算10批脑得生的相似度，结果如下：0.992，0.983，0.970，0.948，0.929，0.968，0.991，0.956，0.968，0.939。相似度结果存在着较小的差异，说明工艺的稳定性很好，生产10批脑得生软胶囊的质量稳定。

　　2.8 脑得生软胶囊与3种市售脑得生片指纹图谱比较比较3种市售脑得生片与自制脑得生软胶囊指纹图谱，可以看出，市售3个不同产地脑得生中A制药厂和C制药厂生产的脑得生片的指纹图谱与自制脑得生软胶囊指纹图谱相似程度高，而B制药厂生产的脑得生片的指纹图谱则存在较大差异。见图3。

　　采用夹角余弦法，计算4种脑得生制剂(A、B、C和自制)间的相似度，结果如下：0.881，0.792，0.910，0.948。相似度结果存在着较大的差异，且B制药厂生产的脑得生片的指纹图谱相似度小于0.8，而A、C制药厂与自制脑得生软胶囊指纹图谱的相似度接近，说明脑得生软胶囊与A、C两制药厂生产的脑得生片质量基本一致。

　　图3 不同来源样品指纹图谱比较

　　3 讨论

　　高效毛细管电泳是近年来发展较快的一种高效分析技术，在中药研究中应用，越来越受到人们的重视。它具有高效、快速、进样体积小、溶剂消耗少和抗污染能力强等特点;分析中药样品时前处理过程简单，有时甚至无需处理，因此，在中药有效成分分析、指纹图谱研究等方面已显示出显著的优势。本研究采用高效毛细管电泳法(HPCE)，建立了复方脑得生软胶囊的指纹图谱，标定了16个共有峰，其峰面积达到90%以上，图谱清晰，其精密度试验、稳定性试验和重复性试验良好，各项技术参数符合相关规定[3]。

　　实验中比较了195～500 nm所得的HPCE图谱，结果在260 nm波长检测时，其HPCE图谱中可见较多的色谱峰，同时各色谱峰分离度较好，故确定260 nm为检测波长。

　　10批脑得生软胶囊和3种不同厂家脑得生的指纹图谱研究表明，自制10批脑得生软胶囊及A、C制药厂生产的脑得生片的指纹图谱的相似度高，但B制药厂生产的脑得生片的指纹图谱相似度小于0.8。结果说明，自制脑得生软胶囊工艺可靠、质量稳定;不同厂家的脑得生片质量有所不同，但多数是稳定一致的;所建立的指纹图谱为有效控制脑得生制剂的质量提供了参考依据。

【参考文献】
  　[1] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京：化学工业出版社，2005：572.

　　[2] 王光忠，李 桥，宋 恬，等.D-101树脂富集复方脑得生中总黄酮的工艺研究[J].中国中医药信息杂志，2009，16(7)：50.

　　[3] 国家食品药品监督管理局.中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)[Z].1999年.