加味当归补血汤浓缩丸对环磷酰胺化疗裸鼠S180肉瘤模型的影响

             作者：解斌，黄雪君，刘满华，曾晓会，黄琼，杜铁良

【摘要】  目的观察加味当归补血汤浓缩丸对环磷酰胺化疗肿瘤的减毒增效作用。方法裸鼠皮下接种S180肉瘤，环磷酰胺腹腔注射给药，合用加味当归补血汤浓缩丸高、中、低剂量，给药10 d后观察裸鼠红细胞数、红细胞压积、瘤重、瘤系数等。结果环磷酰胺能明显降低裸鼠肉瘤重量和肉瘤系数，显著减少裸鼠脾脏系数、红细胞数和红细胞压积，加味当归补血汤浓缩丸与其合用后可进一步降低荷瘤裸鼠肉瘤重量和肉瘤系数，增大脾脏系数，明显增加红细胞数和红细胞压积。病理检查显示，加味当归补血汤浓缩丸与环磷酰胺合用后可显著促进瘤细胞坏死，降低瘤细胞密度，减少瘤细胞数。结论加味当归补血汤浓缩丸对环磷酰胺化疗肿瘤有明显减毒增效作用。

【关键词】  加味当归补血汤浓缩丸; 环磷酰胺; S180肉瘤

　　Abstract：ObjectiveTo observe the reducing toxicity and increasing effect of modified Danguibuxuetang concentrated pills(MDCP) on S180 tumor model in BALB/c-nu/nu treated with CTX.MethodsS180 cell was implanted into BALB/c-nu/nu and CTX combined with ig MDCP. The number of red blood cell,hematocrit, tumor weight, tumor factor were observed after medicating 10d.ResultsMDCP combined with CTX could further reduce the tumor weight and tumor factor, increase the number of red blood cell and hematocrit in BALB/c-nu/nu tumor model. Pathological examination revealed MDCP combined with CTX could further promote the tumor cell necrosis, reduce the number of tumor cells. ConclusionMDCP can reduce the toxicity of CTX and increase the effect of CTX.

　　Key words：Modified Danguibuxuetang concentrated pills; CTX; S180 cell

　　当归补血汤出自李东垣的《内外伤辨惑论》，全方由黄芪、当归组成，二药用量之比为5∶1，为经典的气血双补名方，主治劳倦内伤、气弱血虚。该方临床应用十分广泛，治疗贫血的相关药理研究十分活跃，为临床常用补血基本方之一，本方现代主要用于治疗贫血、白细胞减少症、对抗放化疗副作用等[1]。加味当归补血汤浓缩丸是在当归补血汤的基础上进行加味组方，临床用于肿瘤化疗辅助有较好功效，本文主要进行加味当归补血汤浓缩丸与环磷酰胺合用的实验动物疗效观察，为临床用药提供实验依据。

　　1 材料与仪器

　　1.1 供试品加味当归补血汤浓缩丸、加味当归补血汤原处方浓缩丸由广东省中医研究所制剂研究室提供，批号均为20081022。十一味参芪胶囊，大连汉方药液有限公司，批号20080807。

　　1.2 S180肉瘤株购自中山大学。

　　1.3 试剂注射用环磷酰胺，山西普德药业有限公司，批号20080104。

　　1.4 仪器BS224S电子天平(1/万)，德国SARTORIUS产品。KX-21全自动血球计数仪，日本东芝产品。

　　1.5 动物SPF级BALB/c-nu/nu裸鼠，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供，实验设施合格证号和动物合格证号分别为SCXK(粤)2008-0002和粤监证字2008A053。本实验使用SPF级动物实验室，实验设施使用许可证号为SYXK(粤)2005-0059。

　　2 方法

　　2.1 S180荷瘤裸鼠模型的建立无菌条件下抽取6～7d生长良好的S180小鼠的腹水，按1∶3用生理盐水稀释，反复冲打，充分混匀，在显微镜下计数，用生理盐水调整细胞数为1.5×107个·ml-1。取BALB/c-nu/nu裸鼠28只，雌雄各半，每只小鼠背部碘酊消毒后皮下接种S180瘤细胞液0.2 ml。瘤株接种前均用0.2%台盼蓝染色，计算活细胞数为95%～98%。从抽取腹水时开始，到移植完最后1只小鼠的总时间控制在1 h内。

　　2.2 分组及给药接种7 d后，裸鼠背部肉瘤已生长形成块状物。取上述接种肉瘤细胞的BALB/c-nu/nu裸鼠按体重随机分为7组，分别为荷瘤对照组、环磷酰胺(CTX)组、CTX+参芪胶囊组、CTX+加味当归补血汤浓缩丸高剂量组、CTX+加味当归补血汤浓缩丸中剂量组、CTX+加味当归补血汤浓缩丸低剂量组、CTX+加味当归补血汤原方浓缩丸组，每组4只，雌雄各半。另取4只未接种肉瘤细胞BALB/c-nu/nu裸鼠作为正常对照组，雌雄各半。

　　环磷酰胺腹腔注射给药，注射体积为10 ml·kg-1，1次/d，连续10 d，正常对照组、荷瘤对照组及其余各给药组同法腹腔注射生理盐水10 ml·kg-1。加味当归补血汤浓缩丸各剂量组及阳性对照药参芪胶囊组按剂量灌胃给药，给药体积为20 ml·kg-1，1次/d，连续10 d，正常对照组、荷瘤对照组及CTX组同法灌胃给予蒸馏水20 ml·kg-1。

　　2.3 检测指标外周血常规：于给药后第10天，将各组裸鼠摘眼球采血于肝素抗凝管中，血细胞自动分析仪检测血常规。