壁虎不同提取工艺成分抗肿瘤作用的研究

来源:岁月联盟 作者: 时间:2015-05-19

  2.2 抗肿瘤作用的比较[7]

  2.2.1 对S180荷瘤小鼠的影响无菌抽取传代8 d的S180腹水小鼠腹腔肿瘤细胞,加入生理盐水调整浓度至4×109个/L,于每只小鼠右腋下注射0.2 ml,接种140只。接种24 h后,将小鼠随机分为7组,每组20只,即模型组、原粉组、水煎煮组、胃蛋白酶酶解组、胰蛋白酶酶解组、仿生酶解组与阳性对照组。模型组灌胃生理盐水10 ml·kg-1,连续10 d;原粉组、水煎煮组、胃蛋白酶酶解组、胰蛋白酶酶解组、仿生酶解组均5 g药材·kg-1药液,连续10 d;阳性对照组腹腔注射环磷酰胺,剂量30 mg·kg-1,连续3 d;给药量均为10 ml·kg-1。第11天,各组动物颈椎脱臼处死,剥离肿瘤、胸腺、脾脏,称重,计算抑瘤率、胸腺与脾脏指数,计算公式如下:

  抑瘤率(%)=(空白组瘤重均值-样品组瘤重均值)/空白组瘤重均值×100%

  胸腺(脾脏)指数=重量(mg)/体质量(g)

  2.2.2 对H22荷瘤小鼠的影响建模方法、给药方式、剂量均同S180荷瘤小鼠(对照组为5-Fu,25 mg·kg-1)。

  2.3 统计学方法实验数据采用SPSS 10.0统计软件进行分析,所有测定数值以±s表示,采用方差分析法进行分析,P<0.05为有显著性差异,P<0.01为有极显著性差异。

  3 结果

  3.1 对S180荷瘤小鼠的影响

  3.1.1 对S180荷瘤小鼠抑瘤率的影响结果见表1表1 对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的影响

  3.1.2 对S180荷瘤小鼠脾脏、胸腺指数的影响结果见表2表2 对S180荷瘤小鼠免疫器官的影响

  3.2 对H22荷瘤小鼠的影响

  3.2.1 对H22荷瘤小鼠抑瘤率的影响结果见表3表3 对H22荷瘤小鼠抑瘤作用的影响

  3.2.2 对H22荷瘤小鼠脾脏、胸腺指数的影响结果见表4表4 对H22荷瘤小鼠免疫器官的影响

  4 讨论

  壁虎在临床上常用于肿瘤,特别是消化道肿瘤的治疗,一般焙干研细或水煎煮入药,但壁虎起抗肿瘤作用的物质基础还不清楚。小分子肽抗肿瘤作用逐渐引起了人们的注意。越来越多的研究表明,动、植物含有小分子肽具有很好的抗肿瘤作用,世界上许多国家正在竞相研究开发小分子肽类抗肿瘤的防治药物,如谷胱甘肽、海参五肽、槲寄生肽、胸腺五肽等[8,9]。本研究运用酶解的方式,使壁虎含有的蛋白类成分酶解成小分子肽,对其抗肿瘤作用进行研究。研究结果表明,壁虎经酶解后的抗肿瘤作用明显高于原粉组与水煎煮组。

  本实验中的壁虎仿生酶解是指模拟人体消化过程,先用胃蛋白酶酶解,再以胰蛋白酶酶解的方法,对壁虎药材进行酶解。

  小分子肽的界限划分迄今未有明确定义,鉴于国内外热门研究小分子肽的相对分子质量都在3 000以下[10],本实验中3种酶解液均为经过超滤所得的相对分子质量小于3 000的小分子肽。

【参考文献】
   [1] 叶云珍. 中药壁虎的研究进展[J].中药材,2009,32(7):1160.

  [2] Shimonishi Y. Peptide Science-Present and Future[M].Dordrecht:Kluwer Academic Publishers,1999:436.

  [3] 王爱华,柳美玲,戴志明,等.小肽的吸收机制与营养价值研究进展[J].上海畜牧兽医通讯,2008,2:7.

  [4] 王克夷.开发小肽,筛选新药[J].中国生化药物杂志,2003,24(1):48.

  [5] 钱 方,邓 岩,刘 阳,等.胃蛋白酶水解大豆蛋白的研究[J].中国乳品工业,2001,29(3):10.

  [6] 黄开华,周艳明,吴 畏,等.胰蛋白酶酶解鹿血条件的优化[J].湖北农业科学,2007,46(2):302.

  [7] 徐叔云.药理学实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2001:1270.

  [8] 徐桂华,毕力夫,苏秀兰.抗肿瘤生物活性肽研究进展[J].中国医药生物技术,2007,2(2):130.

  [9] 张延坤,张东祥.生物活性肽的抗肿瘤作用及其机理研究进展[J].中国生化药物杂志,2006,27(6):379.

  [10] 刘绛光,张海鸿.小分子肽分离方法研究进展[J].中国生化药物杂志,2005,26(4):244.

图片内容