毛冬青药材中毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷B2的含量测定的研究

　　2.4 蒸发光散射检测器的条件考察

　　2.4.1 漂移管温度的选择在上述色谱条件下，先固定漂移管的气流量为2.5 L/min，改变漂移管温度，用毛冬青皂苷B2和毛冬青皂苷甲混合对照品溶液进样，记录色谱图，测定两个对照品的峰面积及信噪比(S/N)，选择峰面积和信噪比两者均为最大值时的温度，从实验结果中得到最优化的漂移管温度为107℃。

　　2.4.2 漂移管中气流量的选择在上述色谱条件下，固定漂移管的温度为107℃，改变漂移管的气流量，用毛冬青皂苷B2和毛冬青皂苷甲混合对照品溶液进样，测定两个对照品的峰面积及信噪比(S/N)，选择峰面积和信噪比两者均为最大值时的气流量，从实验结果中得到最优化的漂移管气流量为2.6 L/min。因此，蒸发光散射检测器的条件选择：飘移管温度为107℃，气体流速为2.6 L/min。

　　2.5 标准曲线的制备分别取毛冬青皂苷B2和毛冬青皂苷甲对照品各约9 mg和52 mg，同置于10 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释到刻度，从中吸取1，2，5，7.5，10和12.5 μl注入色谱仪中进行测定，结果毛冬青皂苷甲在5.19 ～64.88 μg的范围内，浓度与峰面积的对数值呈一直线，回归方程为logA=1.329 7 logC + 4.6775, 相关系数 r=0.999 8( n=6 );毛冬青皂苷B2在0.9 ～11.25 μg的范围内，浓度与峰面积的对数值呈一直线，回归方程为logA = 1.551 8 logC + 4.512 6 , 相关系数r=0.999 7( n=6 )。1. 毛冬青皂苷B2 2. 毛冬青皂苷甲图1 混合对照品(A)和样品(B)色谱图

　　2.6 溶液的稳定性实验取供试品溶液1份，在不同的时间点测定，结果在24 h内稳定性很好。

　　2.7 重复性实验取同一批毛冬青药材，分别制配6份相同浓度的供试品溶液进行测定，计算得毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷B2的平均含量分别为2.09%和0.44%，RSD分别为0.85%和1.33%。

　　2.8 回收率实验取同一批毛冬青药材适量，加入一定量的毛冬青皂苷B2和毛冬青皂苷甲对照品，共6份，制成供试品溶液，进行测定，计算毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷B2平均回收率分别为100.26%和101.39%，RSD分别为1.09%和1.46%。结果见表1～2。表1 毛冬青皂苷甲的回收率实验结果

　　2.9 药材的测定对从不同产地、不同时间采集的毛冬青药材，经干燥粉碎，过4号筛，分别取1.5 g，精密称定，按上述方法操作，测定。结果见表3。表2 毛冬青皂苷B2的回收率实验结果　表3 毛冬青药材含量测定结果

　　3 讨论

　　毛冬青药材中的大部分皂苷类物质没有紫外吸收，我们采用蒸发光散射检测器对其中的皂苷类物质进行检测，可得到满意的结果。

　　本药材试用过不同浓度的乙醇和甲醇，超声和回流提取不同的时间，实验结果表明，毛冬青药材采用95%乙醇100 ml，回流2 h，提取比较完全，毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷B2的含量均最高。

　　本法中浓度和峰面积的对数值曲线为一良好的直线，此直线未过原点，因此在本方法中应采用外标两点对数方程来进行计算。测定时分别精密吸取混合对照品溶液5 μl和10 μl;及供试品溶液5～10 μl注入液相色谱仪。

　　本方法经实验证明，准确性高，重复性好，简便快速，适合作为毛冬青药材的质量控制方法。

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