更年期抑郁症与海马、皮质5-HTR1AmRNA相关性的实验研究

　　3 结果

　　3.1 总RNA检测分析见图1。图1 总RNA电泳图

　　3.2 海马5-HTR1A mRNA的半定量RT-PCR分析以管家基因G3PDH为参照，分析5-HTR1a在各组间的不同表达。见图2～3及表5。M.代表DNA分子量标准 1～6.中药组 7～12.西药组13～18.模型组 19～24.更年期组 25～30.假手术组图2 G3PDH基因RT-PCR产物电泳图M.代表DNA分子量标准 1～6.中药组7～12.西药组 13～18.模型组 19～24.更年期组25～30.假手术组图3 5-HTR1AmRNA基因RT-PCR产物电泳图表5 各组大鼠海马5-HTR1AmRNA转录水平的比较各组大鼠海马5-HTR1A mRNA转录水平的比较，模型组大鼠低于假手术组，有极显著性差异(P<0.01);中药组高于模型组、西药组，均有极显著性差异(P<0.01)，略低于假手术组，但无差异(P>0.05 );西药组高于模型组，但无差异(P>0.05 )，低于假手术组，有显著性差异(P<0.01);更年期组低于假手术组，差异显著(P<0.01)。

　　3.3 皮质5-HTR1AmRNA的半定量RT-PCR分析以管家基因G3PDH为参照，分析5-HTR1a在各组间的不同表达。结果见图4～5及表6。　　M-代表DNA分子量标准 1～6.中药组 7～12.西药组13～18.模型组 19～23.更年期组 24～28.假手术组图4 G3PDH基因RT-PCR产物电泳图　　M-代表DNA分子量标准 1～6.中药组 7～12.西药组13～18.模型组 19～23.更年期组 24～28.假手术组图5 5-HTR1AmRNA基因RT-PCR产物电泳图表6 各组大鼠皮质5-HTR1AmRNA转录水平的比较各组大鼠皮质5-HTR1A mRNA转录水平的比较，模型组低于假手术组，有显著性差异(P<0.01);中药组高于模型组、西药组，均有显著性差异(P<0.01)，低于假手术组，差异显著(P<0.01);西药组高于模型组，差异显著(P<0.01)，低于假手术组，有显著性差异(P<0.01);更年期组低于假手术组，有显著性差异(P<0.01)，但高于模型组，差异极显著(P<0.01)。

　　4 讨论

　　5-HT在中枢涉及调节情感、睡眠、警觉、记忆、食欲、性欲等多种功能，5-HT前体色氨酸有提高情绪的作用，5-HT耗竭剂能使抑郁症状加剧;抑郁症自杀患者脑脊液中5-HT及其代谢产物5-HIAA含量下降，其降低程度与症状严重成正比。

　　目前临床所用抗抑郁药物均可快速增加突触间隙5-HT浓度，然而发挥抗抑郁效应却在治疗2～3周后。2～3周的起效潜伏期提示，5-HT浓度的增加仅仅是发挥抗抑郁作用的初始环节，抑郁改善之前突触前后的5-HT系统一定有长时程适应性改变，推测可能同5-HT受体的正负反馈调节有关。

　　随着分子生物学的研究进展，5-HT1A受体与抑郁症及抗抑郁剂的机理正在逐渐被阐明。5-HT1AR含有421个氨基酸，属G蛋白偶联受体家族。在抑郁症中， 5-HT1A自身受体超敏，抑制钙通道的活性，使钙电流减少而缩短动作电位时程，5-HT的释放量相应减少[3];突触后膜5-HT1AR主要调节5-HT释放。5-HT1AR转导机制主要是偶联G蛋白，抑制腺苷酸环化酶(AC)。虽然有许多5-HT1AR与抑郁症的报道，但未获一致的肯定。很多研究者认为在抑郁症中，海马突触后膜的5-HT1A受体低敏状态可能是通过“5-HT1A受体-G蛋白偶联-cAMP信号转导”系统介导的。

　　急慢性应激后相关脑区5-HT1A受体mRNA的表达降低，可能会对大脑结构和功能造成损害。海马结构富含各种信使受体，尤其是皮质激素、兴奋性氨基酸和5-HT1A受体，在应激反应中，它不仅是高位调节中枢，更是受应激累及的最敏感区域。

　　现代研究显示啮齿类、灵长类和人类抑郁症中前额叶皮质都有密集的5-HT神经轴突支配，并有各种5-HT受体分布，其中最丰富的为5-HT1A受体。

　　本研究结果发现模型组大鼠海马、皮质5-HTR1AmRNA转录水平显著下降，这与近期国外报道一致[4]。尸检研究发现在重型抑郁症患者海马突触后5-HT1A受体mRNA减少，抑郁症自杀患者也观察到突触后5-HT1A信号转导减少[5]。5-HTR1AmRNA转录水平低下可否作为抑郁症诊断及治疗的直接判定标准有待进一步研究。

　　本研究亦显示经中药一解合方治疗后，更年期抑郁症大鼠海马、皮质5-HTR1AmRNA转录水平明显升高，与模型组、西药组比较均有显著性差异(P<0.05)，与假手术组比较无差异(P>0.05)，提示一解合方在基因水平是通过影响突触后5-HT1ARmRNA转录水平而发挥抗抑郁作用。突触后5-HT1ARmRNA转录水平有可能正是中医治病求本之“本”，有待进一步证实。

【参考文献】
  　　[1] 刘艳玲，宋卓敏，丁 雨.一解合方对更年期抑郁症大鼠海马、皮质5-HTR1A表达的影响[J].四川中医，2009,27(4):10.

　　[2] 董 莉, 吕 嵘,洪 岩.补肾解郁清心方对更年期抑郁症模型大鼠HPO轴及单胺类神经递质的影响 [J]. 上海中医药大学学报，2003,17(2):38.

　　[3] Claus N，Kristin C. Selective modulation of Ca2+ influx pathways by 5-HT regulates synaptic long-term plasticity in the hippocampus[J]. Brain Research，2005，1037: 187.

　　[4] Arango V，Underwood MD，Boldrini M，et al. Serotonin IA receptors，serotonin transporter binding and serotonin transporter mRNA expression in the brainstem of depressed suicide victims[J]. Neuropsychopharmacology，2001，25:892.

　　[5] Stockmeier CA. Invovlement of serotonin in depression: evidence from postmortem and imaging studies of serotonin receptors and the serotonin transporter[J]. J Psychiatr Res，2003，37(5):357.