松花粉总黄酮对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用
3 结果
3. 1 对血清中ALT和AST含量的影响 CCl4模型组与空白对照组比较，血清ALT及AST均明显增高(P<0. 01)。与CCl4模型组比较，松花粉总黄酮高、中、低剂量组均可明显降低肝损伤小鼠血清ALT及AST活力。表1 松花粉总黄酮对小鼠急性肝损伤血清中ALT，AST活力的影响
3. 2 对肝组织中MDA和SOD含量的影响CCl4模型组与空白对照组比较，肝组织中MDA含量明显增高，SOD活性明显降低(P<0.01)。与CCl4模型组比较，松花粉总黄酮高、中剂量组均能明显降低肝损伤小鼠肝组织中MDA含量并能增高SOD的活性。表2 松花粉总黄酮对小鼠急性肝损伤肝组织中MDA含量、SOD活性的影响
3. 3 对四氯化碳肝损伤小鼠肝脏病理组织的影响 肉眼观察，空白对照组小鼠肝脏外观呈红褐色，质地软而富有弹性;模型组小鼠肝脏外观体积肿大，质脆，边缘钝而厚，表面呈暗红色。镜下可见空白对照组小鼠肝小叶结构清晰，细胞排列整齐，结构及形态正常，肝细胞索状结构清晰可辨，以中央静脉为中心呈放射状排列，肝窦清晰;模型组小鼠肝小叶正常结构被破坏，肝细胞明显肿胀变性，细胞境界不清，细胞索解离，细胞肿胀、混浊，可见较多的点状、片状坏死灶，肝组织充血，伴有淋巴细胞、单核细胞广泛浸润。松花粉总黄酮高中剂量组及联苯双酯组小鼠较模型组肝损伤程度明显减轻，镜下可见松花粉总黄酮高、中剂量组及联苯双酯组的肝小叶结构基本完整，细胞排列较整齐，肝细胞肿胀、坏死、肝组织充血明显减轻，有少量的肝细胞脂肪变性和较少的炎症细胞浸润，而小剂量组大鼠的肝组织充血、肝细胞坏死及炎症细胞浸润较明显，亦可见点状或带状坏死。
4 讨论
肝病是一种发病率高、难以根治的疾病，对人类健康危害极大。各种病因引起的急性肝病及有毒物质所致的肝脏损伤均可引起肝细胞炎症或坏死，并继发纤维化的病理过程。大量研究表明，在肝细胞病变过程中，自由基、酶以及脂质过氧化等均发挥重要作用。保护肝细胞，减少各种损伤因素，可以防止或延缓肝纤维化的形成。
CCl4为重要的化工原料和有机溶剂，是实验性肝损伤动物模型所用的外源性化合物，主要经呼吸道和消化道进入体内， 四氯化碳(CCl4)肝损伤为目前国际常用的肝炎模型之一[6]， 也是经典的筛选和研究治疗肝炎类药物的病理模型。在形态学、病理生理学的某些方面与人慢性肝病较为相似[7,8]。
CCl4进入体内后，在肝微粒体细胞色素P450作用下激活后形成三氯甲基自由基(·CCl3)、二氯甲基自由基(·CCl2)及过氧化甲基自由基(·OOCCl3)等[9]，这些自由基可攻击脂质细胞膜下的不饱和脂质，引起肝细胞脂质过氧化性损伤[10]，脂质过氧化产物对细胞膜的结构和功能造成不可逆转的改变[11]。AST和ALT是肝损伤的标志酶，在正常条件下，这些酶主要存在于细胞核和线粒体内，当细胞膜受到损伤时就会释放，在体液中流通，故血清中AST和ALT酶活性的升高为反映肝功能受损的特异性指标[12,13]。在引起脂质过氧化同时，CCl4还能减弱体内内源性抗氧化酶(如SOD)活性，致使大量自由基无法清除，MDA是脂质过氧化的主要降解产物，可进一步损伤肝细胞的结构，导致肝细胞坏死。
因此，增强机体抗氧化能力，可能成为预防CCl4肝损伤的重要途径[14,15]。本研究结果表明，对小鼠预先使用松花粉总黄酮，能显著降低CCl4引起的急性肝损伤后血清中ALT和AST的水平，明显减轻肝细胞的变性坏死和炎性浸润等病理改变，同时还明显降低肝组织MDA的含量，并且有效提高了SOD的活力。这些结果提示，松花粉总黄酮对CCl4所致小鼠急性肝损伤的保护作用，可能与其通过提高机体抗氧化酶的生物合成而增加酶活力，清除自由基抑制脂质过氧反应，降低脂质过氧化主要产物MDA的产生，提高肝细胞抗氧化能力，从而拮抗CCl4引起的膜脂质过氧化，促进肝细胞的再生和修复有关。肝组织的病理检验结果也证实了这一点。更深入的作用机制有待进一步研究。
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