左归丸和右归丸对老年大鼠杏仁核促肾上腺皮质激素释放激素表达与HPA轴活性作用的实验研究

　　2.5   放免法检测血清皮质酮 

　　按试剂盒说明操作，γ-射线计数仪检测cpm（管/min）。

　　2.6   数据、图像处理及结果分析 

　　Western Blot图片采用可见分析装置进行图像处理、拍照，Smartview分析软件对条带进行密度扫描，得出条带密度值。结果以扫描密度值表示；放免结果由分析软件将所测放射性比活度根据浓度曲线转化为浓度。所得数据均采用±s表示，SPSS10.0统计软件进行单因素方差分析（one-way ANOVA）。

　　3  结果

　　3.1  各组大鼠杏仁核CRH多肽表达 

　　由表1可知，与青年对照组比较，老年对照组大鼠杏仁核CRH多肽表达显著增高；与老年对照组相比，左归丸组及右归丸组大鼠杏仁核CRH多肽表达显著下降。表1  大鼠杏仁核CRH多肽表达（略）

　　3.2  左归丸和右归丸对老年大鼠血清皮质酮（CORT）含量的影响  由表2可知，与青年对照组比较,老年对照组大鼠血清CORT含量显著增高（P<0.05）；与老年对照组比较，左归丸组和右归丸组大鼠血清CORT含量显著下降（P<0.05）。 表2  大鼠血清CORT含量（略）

　　4  讨论
   
　　下丘脑CRH是启动HPA轴调控的重要因素。但下丘脑以外CRH的调节作用却知之甚少。1996年，Gray提出杏仁核含有高浓度的CRH结合蛋白、CRH受体和皮质类固醇受体，提示杏仁核与CRH关系密切。最近研究报道，杏仁核含CRH并参与对HPA轴的调节，衰老可引起杏仁核及下丘脑CRH的增高［2］。实验发现，CORT可刺激杏仁中央核表达CRH mRNA［3］，CRH可增强杏仁中央核GABA能突触传递，这种效应是由CRH1受体介导的［4］。因此，推测杏仁核不是通过GABA能神经元抑制PVN，而是通过分泌CRH直接作用于下丘脑，兴奋性调控HPA轴功能。
   
　　由于杏仁核不仅含有皮质类固醇受体，也含有丰富的CRH神经元。因此杏仁核可以接受HPA轴的糖皮质激素信息反馈，促进CRH的合成和分泌，参与HPA轴环路调节。本实验发现，与青年大鼠比较，老年大鼠杏仁核CRH多肽表达和血清CORT含量显著增高，推测杏仁核可以通过皮质类固醇受体接受HPA轴终末激素GC的反馈信息，上调CRH多肽表达，发挥对HPA轴的兴奋性调控作用，可能是杏仁核对HPA轴行使兴奋性调控的重要机制，左归丸、右归丸可下调杏仁核CRH多肽表达，进而调节老年肾虚大鼠HPA轴功能紊乱。

【参考文献】
  　　［1］Han JS, Bizon JL, Chun HJ，et al. Decreased glucocorticoid receptor mRNA and dysfunction of HPA axis in rats after removal of the cholinergic innervation to hippocampus［J］. Eur Neurosci， 2002,16(7):1399.

　　［2］Herman JP, Tasker JG, Ziegler DR，et al.Local circuit regulation of paraventricular nucleus stress integration: glutamate-GABA connections［J］. Pharmacol Biochem Behav，2002,71(3):457.

　　［3］祖衡兵．细胞因子与A1zheimer病［J］. 国外医学·神经病学神经外科学分册，1998,25(3):154.

　　［4］Turnbull AV, Prehar S, Kennedy AR，et al.Interleukin-6 is an afferent signal to the hypothalamo-pituitary-adrenal axis during local inflammation in mice［J］. Endocrinology，2003, 144(5):1894.