液体中药制剂中苯甲酸和山梨酸含量的高效毛细管电泳法测定

　　3.2缓冲溶液浓度的影响缓冲溶液的浓度通过影响电渗流和介质的黏度而影响分离效果。本文在pH 9.5、20 kV分离电压下，考察了硼砂缓冲溶液在10～60 mmol/L范围内变化时对峰面积和分离度的影响(图2)。结果表明，随着缓冲溶液浓度的增大，分析物的迁移时间延长，大于40 mmol/L时，两组分的峰面积和分离度都显著增加。因此，选择50 mmol/L为缓冲液的最佳浓度值。图1pH值对苯甲酸(B)和山梨酸(S)峰高和分离度(R)的影响图2缓冲液浓度对苯甲酸(B)和山梨酸(S)峰面积和分离度(R)的影响

　　3.3分离电压的影响分离电压与电渗流和焦耳热有关，在一定的范围内，分离电压增大，电渗流增大，焦耳热也增大，分离度减小，检测灵敏度降低。因此，分离电压是影响体系性能的重要因素之一[10]。本文在50 mmol/L硼砂缓冲液，pH9.5的条件下考察了分离电压18～25 kV范围内对分离度、迁移时间及峰高的影响。结果表明，迁移时间随着分离电压的增加而减小，在20 kV时分离度和峰高达到最大，综合考虑分析速度、分离度及检测灵敏度，本文选择最佳分离电压为20 kV。综合上述实验结果，本文选择的分离条件为，pH 9.5的50mmol/L硼砂缓冲液，分离电压20 kV。

　　3.4标准曲线、线性范围和检测限在最佳条件下测定了7个浓度苯甲酸和山梨酸(2.5，5.0，10.0，25，50，100，200μg/ml)的标准混合物溶液，得到峰面积和浓度间的回归方程、线性范围和检测限(LOD)结果见表1，标准谱图见图3 A。　　表1分析物的回归方程、线性范围和检测限

　　3.5精密度为了考察体系的精密度，在上述最优条件下对高、中、低3个标准混合液(10，50，200 μg/ml)分别重复进样6次，用峰面积和迁移时间的RSD作为考察体系精密度的指标。结果见表2。由表中数据可知体系精密度良好。

　　3.6样品和回收率测定果将“2.1.2”制备的样品溶液分别进行测定(图3 B和3 C)，通过比较光谱图和标准加入法对实际样品电泳图中各组分的峰进行确定。样品中各分析物的测定结果见表3。通过标准加入法测定了方法的回收率。结果见表4。由两表可以看出测定量与标示量基本一致，回收率的RSD(%)均小于2%[6]，符合《中国药典》规定。表2精密度(RSD)实验结果图3标准混合溶液和样品溶液电泳图表3样品测定结果表4山梨酸和苯甲酸的回收率

　　4结论

　　本文建立了一种液体药品中苯甲酸和山梨酸含量测定的高效毛细管电泳新方法，分离和测定在15 min内完成，检测灵敏度高，分离效能高，且不需要复杂仪器，可用于液体中药制剂的质量控制。

【参考文献】
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　　[3]班丽娜，许海棠，徐远金. 桂林西瓜霜喷剂中盐酸小檗碱、苦参碱与黄芩苷的毛细管电泳测定[J]. 分析测试学报，2008，27(11)：1217.

　　[4]李玉琴，宗素艳，崔英杰，等. 毛细管电泳-场强放大堆积技术测定制剂中的磺胺嘧啶和磺胺甲唑[J] .分析测试学报，2007，26(6)：784.

　　[5]S.H. Liu, X.G. Chen, Z.D. Hu. Electrophoresis, 2002, 23: 3392.

　　[6]国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S]. 北京：化学工业出版社，2005：制剂通则，附录Ⅰ：H糖浆剂.