荭草不同药用部位抗心肌缺血作用及化学成分比较研究
3结果
3.1 对急性心肌梗塞心电图及梗塞范围和对离体心脏冠脉流量的影响模型组动物心电图出现明显波形改变,J点异常改变,心肌缺血程度持续加重。各药物组除荭草的根及粗茎样品组外,其他各组不同程度改善缺血性心肌心电图,使心肌缺血区的百分率降低,对急性心肌梗死有明显的保护作用,与模型对照组比较差异具有显著性(P<0.05或P<0.01);在对离体心脏冠脉流量的实验研究中,全株、带叶茎枝和花穗增加冠脉流量的作用最为明显(P<0.05或P<0.01),同样根及粗茎效果不理想。综合两项药效学实验结果,荭草带叶茎枝和花穗是改善急性心肌缺血状态和心脏血液供应的有效部位。见表1~3。表1对大鼠结扎左冠状动脉前降支后ECG的影响表2对急性心肌梗塞范围的影响 表3对离体兔心冠脉流量的影响
3.2 荭草药材不同部位异荭草素、荭草素和原儿茶酸的含量 荭草不同药用部位异荭草素、荭草素和原儿茶酸的含量有显著性差异,以茎枝和叶的含量最高,根和粗茎仅含有少量异荭草素,几乎不含荭草素和原儿茶酸。结果见表4。表4荭草药材不同部位含量测定结果
3.3 荭草药材不同部位HPLC指纹图谱 各药用部位指纹图谱的差异直观而明显,根和粗茎的色谱峰较为单一,色谱峰的数量与强度都大大少于花穗和带叶茎枝;花穗和带叶茎枝色谱图的指纹信息较为丰富,具有各自的特征性,又具备一定的相似性,提示花穗和带叶茎枝的有着共同的物质基础。结果见图1~5。图1荭草药材根的HPLC指纹图谱图2荭草药材粗茎的HPLC指纹图谱图3荭草药材花穗的HPLC指纹图谱图4荭草药材带叶茎枝的HPLC指纹图谱图5荭草根、粗茎、花穗、带叶茎枝不同部位指纹图谱中主要峰峰面积棒状图
4讨论
在体情况下,心脏功能受前负荷、神经体液等因素的影响,很难评价药物对心脏的直接作用,因此本研究以Langendorff离体心脏冠脉灌流量实验,采用兔离体心脏模型比较观测了荭草不同药用部位对冠脉流量的影响。Langendorff法是筛选心血管药物的常用方法,常使用大鼠或豚鼠,但动物心脏太小操作不便且稳定性和重复性较差,本研究采用兔为实验对象,结果稳定、重复性好。
根据文献报道,荭草素在舒张血管平滑肌,保护急性缺血在体模型心肌、降低整体动物的心肌耗氧及增加心肌供血等方面[12~14]对心血管系统具有广泛的药理作用;原儿茶酸具有降低心肌氧耗、缓解心肌局部缺血的作用,在治疗心血管疾病方面也有良好的活性[15],故在选择含量测定的指标成分时,既考虑荭草在心血管方面的应用,又兼顾药材中极性差别较大的黄酮类成分和酚酸类成分,确定了含量相对较高而化学性质稳定的荭草素及同系物异荭草素和原儿茶酸,尽量使测定的指标成分与药材药理活性一致。
本研究采用药效学试验结合化学指标成分及指纹图谱综合分析的方法,对贵州产药材荭草的根及粗茎、带叶茎枝、花穗等不同药用部位进行了比较研究。本研究表明,在心血管作用方面带叶茎枝和花穗具有较好的药理活性;理化性质研究的结果显示带叶茎枝和花穗中黄酮类化合物和有机酸类的含量较高,而根及粗茎中黄酮类化合物和有机酸类的含量极低,提示黄酮类化合物和有机酸可能为荭草的有效成分群;指纹图谱信息量的差异亦从更广泛的意义上反映了各药用部位物质基础共性与个性的关系。本研究的后续工作将放大样本量,更进一步、系统地比较荭草中黄酮和有机酸类成分在不同药用部位的分布及不同产地、采收季节等因素对其产生的影响。以上的研究工作,将为临床荭草药材的使用是否区分部位或地域提供科学的依据。
【参考文献】
[1]贵州省药品监督管理局.贵州省中药材、民族药材质量标准[S].贵阳:贵州科技出版社, 2003: 267.
[2]中华本草编委会,国家中医药管理局. 中华本草,第2册[M].上海: 科学技术出版社,1999:681.
[3]江苏新医学院.中药大辞典,下册[M].上海:上海科学技术出版社,1986:1617.
[4]郑兴中,倪峰,王碧英,等. 荭草对心血管的作用的研究[J]. 福建医药杂志,1984,6(6):28.
[5]四十四医院荭草研制组.86铷(86Rb)测定荭草对小鼠心肌营养性血流量的影响[J].贵州医药,1981,5:70.
[6]李勇军,何迅,刘丽娜,等.荭草化学成分的研究[J].中国中药杂志,2005,30(6):444.
[7]王爱民,王永林,刘丽娜,等.荭草药材的质量研究[J].中国中药杂志,2006,31(13):1047.
[8]周雯,刘丽娜,兰燕宇,等.反相高效液相色谱法测定荭草中原儿茶酸的含量[J].贵阳医学院学报,2007,32(1):59.
[9]王爱民,王永林,兰燕宇,等.荭草药材指纹图谱的研究[J].中成药,2006,28(1):5.
[10]黄勇,郑林,王爱民,等.贵州产荭草药材指纹图谱的模式识别研究[J].中成药,2008,30(7):945.
[11]徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学,第3版[M].北京:人民卫生出版社,2001: 986,1052.
[12]付晓春,李少鹏,王敏伟.荭草苷对离体家兔主动脉平滑肌的舒张作用及其机制[J].中国药科大学学报,2006,37(6):539.
[13]付晓春,黄智璇,蔡岳文,等. 荭草苷对犬实验性心肌梗死的影响[J].医药导报,2006,25(7):621.
[14]付晓春,杨群华,黄智璇,等.荭草苷对麻醉犬心功能与血流动力学的影响[J].华西药学杂志,2007,22(3):289.
[15]孙文基,绳金房.天然活性成分简明手册[M]. 北京:中国医药科技出版社,1998:464.