高速逆流色谱法制备岩黄连中的脂溶性生物碱
3 结果
本实验中，曾先后对溶剂系统：正己烷甲醇水、正己烷醋酸乙酯甲醇水、正己烷醋酸乙酯甲醇盐酸、石油醚醋酸乙酯水、石油醚醋酸乙酯甲醇水等进行了筛选。以两相溶液的平衡时间以及目标化合物的分配系数为参数，并结合固定相的保留率，最终确定醋酸乙酯萃取物的HSCCC溶剂系统，如表1所示。
按照表1中的溶剂体系，先后对醋酸乙酯萃取物(见图1)进行3次HSCCC制备分离，分离得到的流份进行HPLC分析，将化学组成相同的流份合并后，浓、缩干燥，收集其中纯度较高的4段组分(见图1：a～d)。经过质谱鉴别及与对照品比较保留时间，确定4组生物碱分别为：a: Cheilanthifoline，ESI-MS: m/z 326 [M+H]+(12.3mg，纯度：76.1%);b: Thalictrifoline，ESI-MS: m/z 354 [M+H]+(3.6mg，纯度：83.1%);c: Tetrahydropalmatine，ESI-MS: m/z 356 [M+H]+ (13.7mg，纯度：85.5%);d: Canadine，ESI-MS: m/z 340 [M+H]+(8.7mg，纯度：78.5%)。 a.Cheilanthifoline b.Thalictrifoline c.Tetrahydropalmatine d.Canadine图1 岩黄连醋酸乙酯萃取物和HSCCC分离产物的HPLC图谱
4 讨论
采用高速逆流色谱法制备分离岩黄连中的生物碱的研究未见文献报道。笔者在前期研究中，采用系统分离方法对岩黄连的醋酸乙酯萃取物部分进行多次柱层析，脂溶性生物碱的得率仅为0.1%左右。本文通过优选溶剂系统，经3次HSCCC分离可从醋酸乙酯粗提物中直接获得较高纯度的生物碱化合物，且产物得率较高(约1.2%～4.6%)。与传统的柱层析分离方法相比，高速逆流色谱法耗时短、步骤简单、节约溶剂，避免了多次反复柱层析造成的样品损失，而且流动相的选择范围较宽，在短时间内可以实现高效分离和制备。
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