柴芩清肝汤高效液相色谱指纹图谱研究

　　2.6指纹图谱的建立将各供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定各样品的HPLC指纹图谱，见图1。经比较分析，确定19个色谱峰为柴芩清肝汤的共有峰，见图2。通过与药材指纹图谱的比较，对各峰进行了归属，其中1~5号峰来自白芍;6,7,10,13~20号峰来自黄芩;9号峰来自甘草。8号峰为白芍，黄芩，甘草共有;11号峰为白芍，甘草共有;12号峰为甘草，黄芩共有。通过与对照品比较，确定5号峰为芍药苷，9号峰为甘草苷，13号峰为黄芩苷。图1柴芩清肝汤10批样品的HPLC指纹图谱

　　2.7指纹图谱相似度分析指纹图谱相似度分析的目标在于通过对指纹图谱进行整体上的分析，来达到评价样品质量是否一致的目的[5]。本实验运用了国家药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004A)进行色谱匹配，计算相似度，结果10批样品的相似度分别为：0.927，0.904，0.900，0.903，0.904，0.904，0.942，0.940，0.939 ，0.933，均在0.9以上。图2柴芩清肝汤共有模式HPLC指纹图谱

　　3讨论

　　实验比较了甲醇-不同浓度磷酸水体系、乙腈-不同浓度磷酸水体系，实验结果表明乙腈-0.1%磷酸水体系较好，基线漂移小，出峰数目多，峰分离情况比较理想。在此基础上，调整乙腈-0.1%磷酸水梯度洗脱的比例关系，最终确定了色谱洗脱条件。分别考察了210，230，254，280 nm波长进行指纹图谱的直观比较，结果230 nm波长检测所得的图谱基线比较稳，分离较好，峰数较多，故选择230 nm为测定波长。相似度评价是指纹图谱研究的一个重要组成部分，所建立的柴芩清肝汤HPLC指纹图谱中，共有19个共有特征(指纹)峰，各特征峰的相对保留时间和相对峰面积较稳定，所建立的方法有较好的重复性，精密度和稳定性，为柴芩清肝汤的质量控制以及衡量其质量的优化提供了科学依据[6]。

　　方中柴胡具有解表和里、疏肝解郁、升举阳气等功效，其中皂苷类成分被认为是其主要的药效成分。但是柴胡皂苷类成分只在紫外末端(203~210 nm)有较弱的吸收[7～9]，因此，在中药复方这个复杂的化学背景下，难以实现对柴胡皂苷类成分的检测，有待于下一步利用蒸发光散射检测法进行分析。

【参考文献】
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