气相色谱-质谱对不同溶剂萃取福建组培金线莲挥发油的分析

               作者：罗明可，陈文娟，吴水华，柯伙钊

【摘要】  　　目的探讨不同溶剂萃取福建组培金线莲挥发油的化学成分差异。 方法采用水蒸气蒸馏法提取福建组培金线莲中的挥发油，用气相色谱-质谱对化学成分进行鉴定，用归一化法确定相对百分含量。结果正己烷萃取的挥发油中分离出35种成分，鉴定出32种组分，占挥发油总量的95.704％；乙醚萃取的挥发油中分离出40种成分，鉴定出31种组分，占挥发油总量的90.858％。主要成分为：亚油酸、棕榈酸和亚油酸甲酯等。结论可为金线莲的进一步研究提供理论依据。

【关键词】  金线莲； 挥发油； 化学成分； 气相色谱-质谱分析

　　金线莲为兰科开唇兰属植物花叶开唇兰Anoectochilus roxburghii （Wall.）Lindl.［1］，又名金线兰、金线草，民间素有“药王”“金草”“神药”“乌人参”等美称。全草药用，味甘、性平，具有显著的清热解毒、祛风除湿、凉血平肝、固肾的功效，临床用于治疗高血压病、高血脂、糖尿病、肿瘤、肺结核咳血、肾炎、膀胱炎、重症肌无力、遗精、风湿性及类风湿性关节炎、小儿惊风、妇女白带以及毒蛇咬伤等症［2，3］。金线莲为典型的阴性药用植物，常生长在荫蔽阔叶林下的肥沃腐叶土中，对林中空气、温度、光照、积温等生态条件要求严格［4］，是福建省和台湾等地极其珍贵、稀少的中药材，1990年即被福建省列入“福建省重点保护野生药材物种”。近年来，由于福建省金线莲主产地的森林植被、水土遭受不同程度的破坏，金线莲赖以生存的自然环境发生变化，加上自身繁殖率低、生长缓慢且虫、鸟等动物喜食以及药农的大量掠夺性采挖，使其野生资源锐减，现已濒绝。鉴于金线莲具有广泛的临床应用价值及极高的经济价值，同时为了保护野生资源，近年来福建省已成功开发了金线莲组培快繁技术，并建立了多个金线莲组培基地。目前，对福建组培金线莲的研究主要集中在组培技术的优化方面，而对其有效成分及挥发性成分的研究，尚未见报道。为了考察福建组培金线莲的内在质量，本文首次对福建组培金线莲采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，分别用正己烷和乙醚萃取，利用GC-MS技术对挥发油中的化学成分进行分析比较。

　　1  仪器与材料

　　1.1  仪器气相色谱-质谱联用仪：6890N Network GC Systerm（美国Agilent公司），5975B Inert xl MSD（美国Agilent公司）；进样系统：7683B Series（美国Agilent公司）；AL204型电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；KQ-100B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AKRY-UP-Ⅲ-10艾柯超纯水机（成都康宁实验专用纯水设备厂）。

　　1.2  药材福建组培金线莲鲜草，购自福建医科大学附属第一医院中药房。

　　1.3  试剂正己烷、乙醚均为分析纯（经重蒸）；超纯水。

　　2  方法与结果
　　
　　2.1  提取过程精密称取福建组培金线莲鲜草两份，各50 g。第一份鲜草用剪刀剪成约5 mm长小段，置研钵中捣烂，加入少量水转移至500  ml圆底烧瓶中，室温超声30 min，用水蒸气蒸馏法进行提取，控制流速3 d/2 s，蒸馏4 h，馏出液用重蒸正己烷萃取3次，萃取液中加少量无水CaCl2干燥过夜，过滤，滤液浓缩后备用；同前法处理第2份鲜草，馏出液改用重蒸乙醚萃取。

　　2.2  气相色谱条件色谱柱为DB-35MS石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm；膜厚0.25 μm）；载气为氦气，流速为1.0 ml/min；不分流进样；进样量为1 μl；升温程序：45℃（保持8 min），以6℃/min到285℃（保持12 min），共计60 min；进样口温度250℃。

　　2.3  质谱条件离子源为EI源；电子轰击电压70 eV；离子源温度为230℃；四极杆温度为150 ℃ ；传辅线温度为280℃；溶剂延迟3.0 min；质量扫描方式为SCAN；扫描范围15～500 aum；NIST107标准质谱检索库。

　　2.4  溶剂空白对照实验取重蒸正己烷、乙醚各适量，分别用0.45 μm滤膜过滤后，按上述GC-MS条件分析，记录总离子流图，见图1和图2所示。

　　2.5  样品的测定取上述两份备用样品，分别通过上述GC-MS条件分析，得到总离子流色谱图，见图3和图4所示。根据NIST标准谱库检索，从正己烷萃取液中检出35个成分，鉴定出32个化合物；从乙醚萃取液中检出40个成分，鉴定出31个化合物。同时用气相色谱峰面积归一化法测定了各种组分的相对百分含量，分别占挥发油总量的95.704％和90.858%，见表1～2所示。表1  正己烷萃取液中挥发油化学成分及相对百分含量，表2  乙醚萃取液中挥发油化学成分及相对百分含量（略）。