鸡骨草胶囊中栀子苷的含量测定

【摘要】  目的 建立鸡骨草胶囊中栀子苷的HPLC测定方法。方法 采用Lichrospher C18色谱柱(5 μm,4.6 mm×250 mm)；以乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)为流动相；流速：1.0 mL/min,检测波长：238 nm,柱温：35 ℃。结果 栀子苷在0.14～1.68 μg范围内呈良好的线性关系,回归方程为：Y=1 552.15X-6.42,r=0.999 9；回收率为97.53% (RSD=1.24%,n=6)。结论 方法稳定、可靠,可用于该制剂的质量控制。

【关键词】  高效液相色谱法；鸡骨草胶囊；栀子苷

Determination of Geniposide in Jigucao Capsule By HPLC  WANG Yan-hong, CHEN Xian

　　Guangxi Yulin Pharmaceutical Co.Ltd.,Yulin 537001, China

    Abstract：Objective To estabilish a HPLC method for the determination of Geniposide in Jigucao Capsule. Methods The column was Lichrospher-C18 (5 μm, 4.6 mm×250 mm). The determination was carried out with acetonitrile-0.1% phosphoric acid (10∶90) as the mobile phase, a flow rate of 1.0 mL/min and detected at 238 nm, and temperature of the column was 35 ℃. Results The calibration curve showed good linearity in the range of 0.14～1.68 μg, Y=1 552.15X-6.42, r=0.999 9. The mean recovery was 97.53% (RSD=1.24%, n=6). Conclusion The method is accurate, reliable, and can be used for quality control of the preparation.
  
　　Key words：HPLC；Jigucao Capsule；Geniposide
 
　　鸡骨草胶囊具有疏肝利胆、清热解毒之功,用于急、慢性肝炎和胆囊炎属肝胆湿热证者,由鸡骨草、栀子、茵陈等药味组方。鸡骨草为方中君药,但由于该味药的植物化学研究工作较薄弱,尚未有符合含量测定要求的对照品,无法对其进行含量控制。茵陈为方中臣药,绿原酸为其消炎利胆的主要有效成分[1],但据资料显示,方中另一味臣药栀子也含有绿原酸[2],由于该成分不具有唯一性,故未作为含量测定指标。我们采用HPLC法测定了栀子中栀子苷的含量,结果显示,方法准确可靠,可用于本品的质量控制。

　　1  仪器、试剂与样品

    上海必能信BUG-40型超声清洗仪；Agilent 1100系列高效液相色谱仪(G1379A Degasser、G1311A QuatPump、G1313A ALS、G1316A Colcom、G1314A VWD)。
   
　　栀子苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号0749-9404,供含量测定用)。乙腈为色谱纯,水为高纯水,其它试剂均为分析纯。鸡骨草胶囊及缺栀子的阴性对照样品由玉林制药有限责任公司提供。

　　2  方法学考察及含量测定

　　2.1  色谱条件
   
　　Lichrospher C18色谱柱(5 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液(10∶90)；流速：1.0 mL/min；检测波长：238 nm；柱温：35 ℃；进样量为10 μL。

　　2.2  溶液的制备

　　2.2.1  对照品溶液的制备 

　　精密称取栀子苷对照品适量,加70%甲醇溶解制成每1 mL含栀子苷50 μg的溶液,即得。

　　2.2.2  供试品溶液的制备 

　　取装量差异项下的本品研细,取0.5 g,精密称定,加70%甲醇50 mL,称重,超声处理(功率500 W,频率50 kHz)30 min,放冷,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,即得。

　　2.3  线性与范围
   
　　精密称取栀子苷对照品14.0 mg,置50 mL量瓶中,加甲醇使溶解并稀释至刻度,摇匀,备用。分别精密吸取以上对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL,分别置10 mL量瓶中,加70%甲醇稀释至刻度,摇匀,进样测定。以对照品进样量为横坐标、峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程为：Y=1 552.15X-6.42,r=0.999 9。结果表明,栀子苷进样量在0.14～1.68 μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系。

　　2.4  精密度试验

    对同一栀子苷对照品溶液(浓度为56 μg/mL),按正文拟订的色谱条件,连续测定6次,结果峰面积平均值为864.1, RSD=0.69%。结果表明,本法的精密度较好。

　　2.5  重复性试验
   
　　对同一批样品(批号625020),按正文拟订的方法平行测定6份,结果栀子苷的平均值为2.590 mg/粒(RSD=1.07%, n=6)。结果表明,本法的重复性较好。

　　2.6  稳定性考察

    对同一供试品溶液(批号625020),在23 h内,每隔一定时间测定1次,共测定6次,试验表明,被测物稳定。6次测定结果的平均值为2.597 mg/粒,RSD=0.69%。表明本柱稳定性较好。