RP-HPLC法测定脑脉通颗粒中人参皂苷的含量

　　2.4  线性关系的考察
   
　　分别精密吸取对照品溶液4、8、10、16、20 μL,按上述色谱条件测定。以色谱峰峰面积为纵坐标,对照品进样量为横坐标,绘制标准曲线并进行线性回归,得回归方程为：人参皂苷Rg1：Y=288 957.987X+9 094.243 8,r=0.999 9；人参皂苷Re：

　　2.5  精密度试验

    精密吸取对照品溶液10 μL,重复进样5次,峰面积积分平均值：人参皂苷Rg1为1 592 968.4,RSD=1.01%；人参皂苷Re为1 101 379.6,RSD=1.04%；人参皂苷Rb1为1 262 951.6,RSD= 1.38%。

　　2.6  稳定性试验

    精密吸取供试品溶液10 μL,分别在制备后0、0.5、1、2、4、6、8 h进样,测定,结果峰面积积分平均值为：人参皂苷Rg1为1 794 377.429,RSD=1.13%；人参皂苷Re为753 876,RSD= 1.20%；人参皂苷Rb1为1 751 400.714,RSD=1.89%。表明样品溶液在8 h内稳定。

　　2.7  重复性试验

    分别取同一供试品6份,按“2.3”项下方法制备样品溶液,按上述色谱条件测定,计算含量平均值。人参皂苷Rg1为0.580%, RSD=1.21%；人参皂苷Re为0.271%,RSD=1.03%；人参皂苷Rg1+Re为0.851%,RSD=0.98%；人参皂苷Rb1为0.651%, RSD= 0.91%。

　　2.8  回收率试验
   
　　精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇分别制成1 mL含2.04 mg人参皂苷Rg1、1.18 mg人参皂苷Re、1.82 mg人参皂苷Rb1溶液备用。取已知含量的样品约0.3 g,共6份,精密称定,分别精密加入人参皂苷Rg1对照品溶液1 mL(2.04 mg)、人参皂苷Re对照品溶液1 mL(1.18 mg)、人参皂苷Rb1对照品溶液1 mL(1.82 mg)置烧杯中,按照供试品溶液制备方法制备供试品溶液,甲醇定容至5 mL量瓶中。按上述色谱条件进行测定,计算回收率,结果见表1。表1  加样回收率试验测定结果（略）
 
　　2.9  样品含量测定结果

    分别精密称取3批样品, 按供试品溶液的制备项下方法制备,按上述色谱条件进行测定,结果见表2。表2  3批样品人参皂苷含量测定(略)

　　3  讨论
   
　　目前,用HPLC法检测人参皂苷类成分的检测器有紫外检测器和蒸发光散射检测器,使用紫外检测器只能用末端吸收(203 nm)进行检测,虽然有干扰,但只要选择好色谱条件,仍能得到满意的结果。
   
　　本实验以《中华人民共和国药典》(2005年版)中人参项下的HPLC法为基础,对脑脉通颗粒中3个人参皂苷进行了含量测定,并分别对精密度、稳定性、重现性和回收率进行了考察。结果表明,在本文介绍的供试品制备方法和色谱条件下,人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1峰分离完好,所建立的方法可以作为脑脉通颗粒的质量控制方法。这为该方的质量标准的建立和控制奠定了基础。

【参考文献】
  　　[1] 任小巧,李建生.脑脉通颗粒对老龄大鼠脑缺血/再灌注损伤脑保护作用的研究[J].中国中药杂志,2004,29(1)：661.

　　[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.7.