高效液相色谱法测定鹰不扑中齐墩果酸的含量

                  作者：蒙毅,钟一雄,范卫锋,黄维安 

【摘要】  目的 建立高效液相色谱法测定鹰不扑中齐墩果酸含量的方法。方法 选用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-0.2%磷酸溶液(85∶15)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长为210 nm。结果 齐墩果酸的平均回收率为95.4%,RSD＝0.67%(n＝6),线性范围为0.059～0.59 μg,r＝0.999 8。结论 本法简便、准确,可用于鹰不扑中齐墩果酸的含量测定。

【关键词】  鹰不扑；齐墩果酸；高效液相色谱法

    Abstract： Objective To establish a HPLC method for determining the content of oleanolic acid in Radix araliae armatae. Methods Stationary phase was Lichrospher-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm), mobile phase was methanol-0.2% phosphoric (85∶15), detection wavelength was 210 nm, flow rate was 1.0 mL/min and column temperature was 30 ℃. Results There was good linearity in the range of 0.059～0.59 μg for oleanolic acid. The average recovery of oleanolic acid were 95.4% with RSD＝0.67% (n＝6). Conclusion This method is rapid and accurate. It can be applied to control the quality of Radix araliae armatae effectively.
   
　　Key words：Radix araliae armatae；oleanolic acid；HPLC
 
    鹰不扑又名鸟不企、老鸦怕等,为五加科植物黄毛楤木Aralia decaisneana Hance的干燥根,主产于广西、广东和湖南等地,具有清热解毒、祛风除湿、散瘀消肿之功效,用于治疗跌打损伤、风湿性腰腿痛、急慢性肝炎、肾炎水肿、淋巴结肿大、咽喉炎、蛇咬伤及糖尿病等症[1]。鹰不扑主要含以齐墩果酸为主的三萜皂苷[2]。齐墩果酸是主要有效成分,原标准(收载于《广西中药材标准》1990年版)未有含量测定项,文献报道仅为薄层扫描法[3]对齐墩果酸进行定量分析。本试验首次采用HPLC法对鹰不扑中齐墩果酸进行含量测定,为药材使用和质量控制提供科学依据。

　　1  仪器与试药
   
　　LC-10AT日本岛津高效液相色谱仪(带紫外可见检测器),日本岛津UV-2001紫外分光光度计,威玛龙化学工作站。
   
　　齐墩果酸对照品(批号110709-200304,含量测定用)由中国药品生物制品检定所提供；鹰不扑由广西玉林制药有限责任公司提供,经广西玉林制药有限责任公司中药鉴定室鉴定为五加科植物黄毛楤木Aralia decaisneana Hance的干燥根。水为重蒸馏水,甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    Lichrospher-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液(85∶15)[4]；流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。理论板数按齐墩果酸计算应不低于3 000(色谱图见图1)。

　　2.2  对照品溶液的制备
   
　　精密称取齐墩果酸对照品适量,加甲醇制成每1 mL含齐墩果酸59 μg的溶液,作为对照品溶液。

　　2.3  供试品溶液的制备

    取鹰不扑粉末约0.5 g,精密称定,置平底烧瓶中,精密加入甲醇-15%盐酸(4∶1)50 mL,称定重量,水浴加热回流5 h,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,滤液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液,作为供试品溶液。