高效液相色谱法测定鹰不扑中齐墩果酸的含量

　　2.4  线性关系的考察

    分别精密吸取齐墩果酸对照品溶液(59.0 μg/mL)1、2、4、6、8、10 mL,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,各进样10 μL,连续进样2次,测定峰面积。以对照品进样量(C)为横坐标,峰面积(A)为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：A＝2.618 6×105C－473.5,r＝0.999 8(n＝6),结果表明,齐墩果酸在0.059～0.59 μg范围内呈良好的线性关系。

　　2.5  精密度试验

    取齐墩果酸对照品溶液,各重复进样6次,测定峰面积,结果齐墩果酸峰面积平均值为157 847,RSD＝0.58%(n＝6)。

　　2.6  重现性试验

    取同一批号样品6份,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,测定,结果齐墩果酸峰面积平均值为120 822,RSD＝1.09%(n＝6)。表明该法重现性良好。

　　2.7  稳定性试验

    取同一供试品溶液,分别于配制后0、4、8、12、24 h依法测定峰面积,结果齐墩果酸RSD＝1.25%,表明样品溶液在24 h内基本稳定。

　　2.8  加样回收率试验
   
　　取已知齐墩果酸含量的鹰不扑粉末约0.2 g,精密称定,平行称取6份,各加入一定量的齐墩果酸对照品,按“2.3”项下方法制备供试液,按上述色谱条件测定。结果齐墩果酸平均加样回收率为95.4%,RSD＝0.67%,说明该方法准确可靠。见表1。 表1  齐墩果酸加样回收率试验结果（略）
  
　　2.9  样品测定

    取鹰不扑样品,按“2.3”项下方法操作,在上述色谱条件下进行测定,结果见表2。表2  样品含量测定结果(略)

　　3  讨论
   
　　齐墩果酸标准品在紫外分光光度计190～500 nm波长范围进行光谱扫描,其最大吸收波长为203 nm,但由于流动相在短波长处有末端吸收,为了减少干扰,提高信噪比,采取不同波长的色谱图进行比较。选择210 nm为检测波长,检测器响应值大,基线平稳,峰形好。
   
　　本试验考察不同的酸(硫酸、盐酸、醋酸)及酸度(5%、15%、30%)回流提取,其中15%盐酸甲醇液直接回流提取的水解效果最好,比一般水解过程(先甲醇提取再水解)简单,重现性好。首次采用HPLC法对鹰不扑中齐墩果酸进行含量测定,精密度优于薄层扫描法,无需显色,结果稳定,方法简便。为用HPLC法测定鹰不扑中齐墩果酸含量,提供了一种可借鉴的方法。
   
　　鹰不扑的传统药用部位为根,本试验考察广西不同地区的鹰不扑,齐墩果酸的含量相差不大,根与茎的含量也相差不大,可以用其茎作为药用部位,扩大药用范围。

【参考文献】
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　　[2] 熊筱娟,高应东,邹盛勤.江西黄毛楤木生药学、化学成分及药理活性研究[J].安徽农业科学,2006,34(6)：1104－1106.

　　[3] 姚向超,邓杏灵,曾池清.薄层扫描法测定黄毛楤木中齐墩果酸的含量[J].江西中医学院学报,2005,17(3)：45－46.

　　[4] 韩 锋,王惠淑.HPLC法测定舒肝灵胶囊中齐墩果酸的含量[J].天津中医药,2006,23(6)：67－68.