冠周康口服液制备工艺研究

   
　　标准曲线的制备：精密称取龙胆苦苷对照品9.5 mg,置10 mL量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,分别精密吸取上述标准溶液0、5、10、15、20 μL,进样,以进样所含龙胆苦苷的量为横坐标(μg),色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程：Y＝726.55X＋196.8,r＝0.998 68。进样量在0～19 μg范围内线性关系良好。
   
　　分别测定各样品的峰面积,根据峰面积来计龙胆苦苷含量。结果见表2,方差分析见表3。表2  试验安排和结果（略）表3  方差分析表（略）注：F0.05(2,2)=19.00,F1-0.01(2,2)=99。
   
　　对表2、表3进行极差、方差分析,影响因素依次为D>A>C>B,
D因素具有显著意义,说明乙醇提取次数对龙胆苦苷含量影响最大,提取次数以3次为佳,故优选最佳条件为A1B3C2D3,即65%乙醇浓度,乙醇用量为12倍,提取时间为1 h,提取次数为3次。但本工艺中,乙醇用量、提取时间为不显著因素,为省时、节能、经济,B因素可选择B1,C因素选择C1,因此,最后确定工艺条件A1B1C1D3。

　　2.3  水煎煮提取工艺研究

　　2.3.1  正交试验设计 

　　选择主要影响提取的加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮次数作为考察因素,以出膏率为指标,应用L9(34)正交设计进行试验。因素水平见表4。表4  因素水平表（略）

　　2.3.2  水煎煮提取 

　　取石膏、蒲公英、甘草和回流后及提油后的药渣、药液,按正交试验设计提取,然后浓缩,用60%的乙醇沉淀,过滤,滤液浓缩至流浸膏,以出膏得率作为考察指标。

　　2.3.3  出膏率的测定 

　　精密量取等量的按正交表设计提取的各组药样,置已干燥至恒重的蒸发皿(Co),水浴浓缩至干,于105 ℃烘箱中干燥3 h,移至于干燥器中,冷却至室温,迅速精密称定重量(Ci),按公式(Ci-Co)/C样×100%,计算出膏率。结果见表5,方差分析见表6。表5  试验安排和结果（略）表6  方差分析表（略）

    由表5可知,各因素对出膏率影响大小依次为D>A>C>B, A、D因素具有极显著意义,直观分析结果表明,最佳提取工艺为A3B1C2D3,因为C因素为不显著因素,根据节约原则,C因素可选择C1,最后确定最佳工艺条件为A3B1C1D3。

　　3  验证试验

    为了验证上述结果的准确性,以保证提取工艺的合理可行,按上述已确定的工艺条件安排重复试验,结果见表7、表8。表7  乙醇提取工艺验证试验结果（略）表8  水煎煮提取工艺验证试验结果（略）

　　按上述得出的提取工艺进行验证试验,共3次,平均龙胆苦苷总量为1.035 5 g,出膏率30.12%,高于正交表中9个试验结果的最高量。从上述试验结果可以看出：所筛选出来的工艺合理可行,稳定可靠,具有可操作性和重现性。

　　4  讨论
   
　　本试验探讨冠周康口服液的制备工艺,经正交设计试验得出最佳工艺：龙胆草、板蓝根、黄芩采用乙醇提取,乙醇浓度为65%,用量为药材总量的8倍,提取时间为1 h,提取次数为3次。其余药物采用水煎煮提取,水用量为药材总量的12倍,浸泡时间为0.5 h,煎煮时间每次为1 h,提取次数为3次。其中无论是醇提还是水提,提取次数是影响提取的主要因素。以最佳工艺制备了3批产品,经外观质量、含量测定、出膏率等方面的考核,均优于其它条件,所制备产品稳定性好,符合质量标准,适合大批量生产。

【参考文献】
  　　[1] 徐旭红,唐风需,顾瑛琪.板蓝根药材及板蓝根口服液提取工艺的探讨[J].海峡药学,2004,16(4)：86－87.

　　[2] 聂中越,程淑娟.HPLC法测定龙胆复方制剂中龙胆苦苷的实验研究[J].深圳中西医结合杂志,2002,12(3)：173－175.