补精益肾颗粒提取工艺的优选

　　2.2.6  精密度试验考察 

　　分别精密吸取同一供试品溶液5 μL,连续进样5次,结果所得淫羊藿苷含量的RSD＝1.58%。

　　2.2.7  重复性试验考察 

　　取5份同一批样品,按供试品溶液制备方法制备,进行测定,结果,淫羊藿苷的平均含量RSD＝2.6%。

　　2.2.8  稳定性试验考察 

　　取同一供试品溶液,按0、2、4、6、8 h时间间隔,分别进样分析,测定色谱峰面积,结果淫羊藿苷在8 h内稳定,RSD＝2.5%。

　　2.2.9  回收率试验考察 

　　精密称取已测知淫羊藿苷含量的样品及一定量的对照品(共5份)按样品含量测定项下方法操作,结果淫羊藿苷平均回收率为99.7%,RSD＝2.6%。

　　2.2.10  样品测定 

　　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μL,注入高效液相色谱仪,按外标法计算。

　　2.3  试验结果

　　(见表3、表4)  表3  浸出物得率方差分析表（略）注：F0.05(2,2)=19.00。表4  淫羊藿苷含量方差分析表（略） 注：F0.05(2,2)=19.00。
   
　　对正交试验所得结果作直观分析和方差分析,以判断各因素对提取效果的影响程度,筛选出在该试验条件下最优的提取条件。由水浸出物得率为考察指标,由表2中极差R值大小分析可知,各因素主次顺序为C>A>B；方差分析结果表明：只有C因素具有显著性意义(P<0.05),A因素和B因素对水提浸出物的得率没有显著性意义(P>0.05),A3B1C3为佳；以淫羊霍苷含量为考察指标,由表2极差R值大小显示,各因素作用主次为B>A>C。方差分析结果表明,A、B、C三因素均对淫羊霍苷含量的影响具有显著性意义(P<0.05),以A2B2C2组合为佳。考虑到淫羊霍苷含量这个指标更为重要,故选择A2B2C2为最佳工艺,提取2次、加水量分别为10倍量和8倍量、提取时间各为1.5 h。

　　2.4  验证试验

    称取处方量药材按A2B2C2进行验证试验,结果与正交试验结果吻合,说明该工艺稳定可行。

　　3  讨论
   
　　采用正交设计试验法来优化中药制剂的提取工艺,可缩短试验周期,减少试验次数,且试验结果可比性强,可进行方差分析,具有很强的实用性。采用高效液相色谱法测定淫羊藿苷具有快速、准确、重复性好等特点并且含量测定结果比较可靠。正交试验考察指标采用淫羊藿中淫羊藿苷提取率为指标,侧重考察有效成分的提取效果,较以固形物得率为指标更为合理。故本试验在最终确定最佳工艺时也是这样取舍的。当然,鉴于目前中医药作用机理研究的不是很深入,因此,以后需要结合临床疗效进一步验证采用淫羊藿中淫羊藿苷提取率为指标并采用正交试验优选得到的工艺是否为最佳工艺。相信随着中医药现代化的深入发展,这些问题会得到很好的解决。

【参考文献】
  　　[1] 谢秀琼.中药新制剂开发与应用[M].北京：人民卫生出版社,2002.135.

　　[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.附录33－34.

　　[3] 刘 霞,杨远明.HPLC测定舒宁片中淫羊霍苷含量[J].中成药,2003, 25(11)：936－937.