HPLC法测定双花滴耳液中绿原酸的含量

　　2.4  阴性对照液的制备

  　  按处方比例及制备工艺,配制不含金银花的阴性对照品,并照上述供试品溶液的制备方法制成阴性对照液。

　　2.5  线性关系考察

  　  精密吸取绿原酸对照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 μL分别进样,按上述色谱条件进行测定,并以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标进行线性回归,得回归方程为：Y＝78 348.12X＋314.58,相关系数r＝0.999 8。结果表明,绿原酸在0.102 4～0.614 4 μg范围与其峰面积积分值呈良好的线性关系。

　　2.6  精密度试验

  　  精密吸取上述对照品溶液10 μL,按上述色谱条件进行测定,连续重复进样5次,绿原酸峰面积RSD＝0.92%,结果表明,该法的精密度良好。

　　2.7  稳定性试验
   
　　取上述对照品溶液及供试品溶液,按上述色谱条件,分别在0、2、4、6、8、10 h测定,结果对照品溶液峰面积积分值RSD＝0.83%,供试品溶液峰面积积分值RSD＝0.90%,表明绿原酸对照品及样品在10 h内稳定。

　　2.8  重复性试验

  　  取5份同一批号供试品10 mL,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件进行测定,绿原酸的平均含量为1.303 mg/10 mL,RSD＝1.24%。实验表明,该法重复性的良好。

　　2.9  加样回收率试验

   　 取5份同一批号已知含量的双花滴耳液5 mL,精密加入0.92 mg绿原酸对照品,按“2.3”项供试品溶液的制备方法操作,按上述色谱条件测定,平均回收率为99.8%,RSD＝1.51%。结果见表1。表1  加样回收率试验结果（略）
 
　　2.10  样品测定

　    取双花滴耳液的5个批号,按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备供试品,按上述色谱条件测定,结果见表2。表2  样品测定结果(略)

　　3  讨论

    在测定该制剂中绿原酸的含量时,曾参照文献[2-3]方法对流动相进行了筛选,比较了甲醇-0.2%磷酸、乙腈-1%乙酸、60%甲醇-10%磷酸氢二钠溶液和乙腈-0.4%磷酸溶液,其中以乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相时,绿原酸与相邻峰基线分离较好。
   
　　本实验建立的HPLC法侧定双花滴耳液中绿原酸含量的方法操作简便、结果准确、灵敏度高、重现性好、回收率高、干扰小,可以用于双花滴耳液的质量控制。

【参考文献】
  　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出板社,2005.附录ⅥD：33.

　　[2] 刘 冰,王蓉华,徐永波.HPLC法同时测定银黄胶囊中绿原酸、黄芩苷含量[J].中国药事,2006,20(5)：303.

　　[3] 孟品佳,孙毓庆.高效液相色谱法分离金银花成份及测定绿原酸含量[J].药物分析杂志,1990,10(1)：58.