HPLC法测定养胃软胶囊中厚朴酚、和厚朴酚的含量

　　2.5  系统适用性试验
   
　　按处方量配制缺厚朴药材的阴性对照样品,照正文含量测定项下方法测定,比较了供试品溶液,厚朴酚、和厚朴酚对照品溶液和阴性对照样品液的色谱图,结果在该色谱条件下,样品中厚朴酚、和厚朴酚峰与其它组分色谱峰能达到基线分离,阴性对照液中色谱峰对测定无干扰(见图1)。

　　2.6  线性关系的考察
   
　　分别精密量取厚朴酚、和厚朴酚对照品储备溶液(厚朴酚浓度为0.294 mg/mL,和厚朴酚浓度为0.102 mg/mL)0.2、0.6、1.0、1.4、2.0、3.0 mL置于10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。分别精密吸取上述对照品溶液10 μL,注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,以进样量(μg)为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),绘制标准曲线,计算回归方程。厚朴酚回归方程为：Y＝1 472 893.126X＋2 380.125,r＝0.999 9；和厚朴酚回归方程为：Y＝1 518 087.221X－3 498.525,r＝ 0.999 8。结果表明,厚朴酚在0.058 8～0.882 0 μg范围内有良好的线性关系,和厚朴酚在0.020 4～0.306 0 μg范围内有良好的线性关系。

　　2.7  精密度试验
   
　　精密吸取厚朴酚、和厚朴酚对照品溶液(浓度分别为0.029 4、0.010 2 mg/mL)10 μL,重复进样6次,按上述色谱条件测定,峰面积积分值的RSD分别为0.55%、0.95%。

　　2.8  样品溶液稳定性试验
   
　　精密称取供试品(批号051008)1.024 5 g,照上述方法制备供试品溶液,精密吸取10 μL,每间隔一定时间进样,厚朴酚、和厚朴酚峰面积积分值的RSD分别为0.62%、0.84%。结果表明,供试品溶液在24 h内基本稳定。

　　2.9  重复性试验
   
　　取同一批号的养胃软胶囊6份,按正文含量测定方法平行试验,测得厚朴酚平均含量为0.741 08 mg/g,RSD＝1.82%；和厚朴酚平均含量为0.256 78 mg/g,RSD＝1.91%。

　　2.10  加样回收率试验
   
　　精密称取已知含量的同一批样品约0.5 g,分别精密加入厚朴酚、和厚朴酚对照品适量,按“供试品溶液的制备”方法制备供试液,平行试验6份,按上述色谱条件测定,计算回收率,结果表明本方法具有良好的回收率。见表1、表2。表1  和厚朴酚加样回收率试验结果（略）表2  厚朴酚加样回收率试验结果（略）

　　2.11  样品测定
   
　　取本品3批,按上述方法测定,计算厚朴酚与和厚朴酚的总量,结果分别为0.998、1.012、1.032 mg/g。

　　3  讨论
   
　　试验中曾比较了甲醇直接超声提取法与氯仿萃取法,结果表明,前者提取液颜色较深,杂质峰多,干扰测定,且污染色谱柱,故选用氯仿萃取法；并对氯仿提取的次数进行了比较,结果提取3次可提取完全。试验中进行了耐用性考察,即用不同的色谱柱和不同比例的流动相进行了比较,结果该样品在本色谱条件下对常用的不同品牌的色谱柱都能得到较好的分离。

【参考文献】
  　　[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.661.

　　[2] 夏厚林,盛 燕,周晓梅,等.高效液相色谱法测定复方厚朴颗粒中厚朴酚及和厚朴酚的含量[J].时珍国医国药,2006,17(10)：1983.