RP-HPLC法同时测定舒肝祛脂胶囊中4种大黄蒽醌的含量

　　2.4  精密度试验

 　   精密吸取混合对照品溶液20 μL,重复进样5次,记录峰面积,计算RSD,分别为大黄酸1.84%、大黄素1.01%、大黄酚0.97%和大黄素甲醚1.51%。

　　2.5  稳定性试验

  　  照“样品溶液的制备”项下方法配制样品(批号061201),分别于0、1、2、3、4 h进样20 μL,记录峰面积,计算RSD,分别为大黄酸1.29%、大黄素1.54%、大黄酚0.43%和大黄素甲醚1.39%,表明样品至少在4 h内稳定。

　　2.6  重现性试验

 　   照“样品溶液的制备”项下方法配制样品(批号061201)5份,取20 μL进样,计算含量,分别为大黄酸83.5 μg/mg、大黄素65.7 μg/mg、大黄酚209.2 μg/mg和大黄素甲醚45.3 μg/mg,RSD分别为1.75%、1.66%、2.42%和4.06%。

　　2.7  加样回收率试验

  　  称取样品(批号061201)约0.36 g,共5份,精密加入大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品适量,照样品溶液的制备项下方法配制,取20 μL进样,计算回收率,结果见表2。表2  加样回收率试验结果(略)
 
　　2.8  样品测定

　    取3批样品(批号分别为060801、061001、061201),照“样品溶液的制备”项下方法配制,平行5份,取20 μL进样,计算含量,结果见表3。表3  样品中4种大黄蒽醌含量测定结果(略)

　　3  讨论
   
　　舒肝祛脂胶囊处方中大黄为主药,而蒽醌类成分为其主要有效成分,包括游离蒽醌和结合蒽醌,它们具有利胆退黄、保肝护肝的作用,所以测定蒽醌类成分含量是该制剂质量控制的重要内容之一。目前测定蒽醌类成分含量的文献报道很多[1-2],但尚未见舒肝祛脂胶囊中多种蒽醌类成分同时测定的文献报道。常见的大黄蒽醌类含量测定方法为HPLC法,本实验参考了2005版《中华人民共和国药典》[3]大黄药材含量测定项下的色谱条件,通过调节两相的比例,得到分离度好、出峰时间适宜的流动相条件。由于其采用水提醇沉工艺,故在本制剂中,游离蒽醌含量很少,在测定前需进行水解。本实验采用了2005版《中华人民共和国药典》[3]大黄药材含量测定项下的提取方法,由于提取步骤比较多,而且在提取过程中需加酸、加热,可能会使蒽醌类物质发生降解或转化,因而导致重现性和回收率试验中的RSD偏大。

【参考文献】
  　　[1] 吴永江,陈建军,程翼宇.RP-HPLC同时测定苦黄注射液中4种大黄蒽醌类成分含量[J].中国中药杂志,2004,29(11)：1041－1044.

　　[2] 蒋 晔,郝晓花,刘红菊.非水反相液相色谱法测定三黄片中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量[J].中草药,2005,36(3)：378－380.

　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.17－18.