紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量

　　2.5  重复性考察
   
　　精密称取两面针药材细粉,按“2.3”项方法提取,于329 nm处测定吸收度,计算含量。结果分别为6.25%、6.22%、6.23%、6.24%、6.26%,RSD＝2.20%(n＝5)。结果表明重复性较好。

　　2.6  稳定性试验

    　取供试品溶液,在0、1、2、4、8、12、18、24 h分别测定吸收度,结果显示在24 h内基本稳定,RSD＝2.14%(n＝8)。

　　2.7  加样回收率试验
   
　　分别精密称取5份已知含量的两面针药材细粉0.05 g,每份精密加入相当于氯化两面针碱3.0 mg的对照品溶液,按“2.3”项方法提取,于329 nm处测定吸收度,计算。回收率分别为101%、99.5%、102%、96%、98.8%,平均为99.5%,RSD＝2.32%(n＝5)。

　　2.8  样品测定
    　　
　　按照以上方法测定3种不同产地两面针药材中总生物碱的含量,每种产地的药材分别平行测定5批。结果见表1。表1  不同产地两面针药材细粉中总生物碱的含量测定结果(略)

　　3  讨论

  　  总生物碱的含量测定一般都采用酸性染料比色法[2-4]或根据单体碱的母核相同直接测定[5],本试验曾试过用溴甲酚绿和溴麝香草酚蓝显色,用比色法在422 nm处测定吸收度,但结果极其不稳定,因此,酸性染料比色法不适用于测定两面针中总生物碱的含量。

 　   两面针中主要含生物碱,且主要为苯并菲啶类生物碱[1]。已报道的7个单体碱在(329±2)nm波长处均有共同吸收[1]。并且样品液用“2.3”项的方法处理后,可有效的排除其它成分的干扰,与测定结果一致。

   　 在大孔树脂纯化总生物碱的工艺中,曾采用XDA-5、HPD-100和LSD-5B等8种大孔树脂对两面针中总生物碱进行吸附和解吸附考察,其中XDA-5的动态吸附分离效果最好,适合于两面针中总生物碱的提纯。

    　由于3种不同产地两面针药材中总生物碱的含量相差较大,经仔细观察,从桂林购买的取药部位是根,而购于南宁、玉林两地的取药部位是茎。因此,药材部位不同总生物碱的含量相差较大,根部比茎部的总生物碱含量明显偏高。故《中华人民共和国药典》中测两面针中生物碱含量取药部位是根是有道理的[6]。
   
　　采用酸水冷浸、60%乙醇回流提取、60%乙醇超声提取3种方法测得的同一批次的两面针药材粉末的含量平均值分别是2.65%、1.65%、6.01%；因此,超声提取方法优于其它两种,并且延长超声时间含量不再增加,表明提取完全。

【参考文献】
  　　[1] 李定祥,闵知大.两面针中生物碱的分离[J].中国天然药物,2004,2(5)：285－288.

　　[2] 王 伟,谭晓梅.荷叶总生物碱含量测定的研究[J].中药材,2004,27(1)：50－51.

　　[3] 张忠会,王惠达,杨 威.罂粟壳生物碱的可见分光光度法测定[J].中成药,2002,24(7)：537－538.

　　[4] 辛海量,赵玉梅,林 峰,等.苦豆草中总生物碱的含量测定[J].解放军药学学报,2002,18(2)：113－115.

　　[5] 张 荣,汤秋华,胡永狮,等.紫外分光光度法测定雷公藤口服液总生物碱的含量[J].华西药学杂志,2000,15(1)：133－135.

　　[6] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2000.133－134.