慈菇消脂丸中大黄素和大黄酚含量的测定

                      作者：靳子明,王谨慧,杨少军 

【摘要】  目的 采用高效液相色谱法测定慈菇消脂丸中大黄素、大黄酚的含量。方法 采用Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5.0 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),流速：0.8 mL/min；检测波长：423 nm；柱温：20 ℃。结果 大黄素、大黄酚在0.25～0.75 μg范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为98.0%(RSD＝1.5%)、99.6%(RSD＝1.8%)。结论 本方法稳定、简便易行,为慈姑消脂丸的生产提供了质量依据。

【关键词】  慈菇消脂丸；大黄素；大黄酚；高效液相色谱法；含量测定

    Abstract：Objective To establish a HPLC method for the determination of the content of emodin and chrysophanol in Cigu Xiaozhi pill. Methods The chromatographic procedure was carried out in Symmetry C18 (4.6 mm×150 mm, 5.0 μm) column with methanol-0.1% phosphoric acid (85∶15) as the mobile phase, flow rate was 0.8 mL/min, column temperature was 20 ·C, and the detection wavelength was 423 nm. Results Emodin and chrysophanol were well separated with other components. The standard curves of emodin and chrysophanol showed linearity in the range of 0.25～0.75 μg. The average recoveries were 101.35% (RSD＝2.26%) and 98.66% (RSD＝1.74%) respectively. Conclusion The method is sensitive, simple and accurate, and can be used for the determination of emodin and chrysophanol in Cigu Xiaozhi pill.

    Key words：Cigu Xiaozhi pill；emodin；chrysophanol；HPLC；content determination
 
    大黄素、大黄酚为慈菇消脂丸中决明子、何首乌的主要成分,该制剂作为甘肃中医学院附属医院院内制剂,主要用于脂肪肝、慢性肝炎和肝纤维化、高脂血症及肥胖患者。多年临床使用表明该制剂具有良好的消脂化瘀功效。为了更好地控制该制剂的质量,本试验采用高效液相色谱(HPLC)法测定了大黄素、大黄酚的含量[1],为该制剂的质量控制提供依据。

　　1  仪器与试药

    高效液相色谱仪(美国Waters公司)：600型二元梯度泵和996型二极管阵列紫外检测器；BP210S电子分析天平(Sarlorius公司)；SK7200H超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司)；IEC Micromax离心机(美国Thermo Electron公司)；Delta 320 pH计(梅特勒-托利多仪器公司)。

    慈菇消脂丸,甘肃中医学院附属医院制剂中心制备(批号20071110)；对照品：大黄素(批号110756-200110)、大黄酚(批号110796-200514),购自中国药品生物制品检定所。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    Symmetry C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),流速0.8 mL/min；检测波长：423 nm；柱温：20 ℃。

　　2.2  对照品溶液的制备

    取干燥至恒重的大黄素对照品、大黄酚对照品10 mg于50 mL量瓶中,精密称重,加甲醇溶解,制成每1 mL含大黄酚对照品、大黄素对照品均为200 μg的混合储备液。精密吸取此储备液,稀释成含大黄素对照品、大黄酚对照品分别为12.50、18.75、25.00、31.25、37.50 μg/mL的对照品系列溶液,备用。

　　2.3  供试品溶液的制备

    取慈菇消脂丸30粒研匀,精密称重200 mg置于10 mL量瓶中,加入甲醇7 mL,置70 ℃水浴上加热30 min,时时振摇,放冷后用甲醇定容,摇匀,过滤,取滤液即得供试品溶液。另取缺决明子和何首乌的慈菇消脂丸,同法制备阴性对照品溶液。

　　2.4  系统适应性试验

    在“2.1”项色谱条件下,将对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液进样分析,结果表明：对照品溶液和供试品溶液中大黄素、大黄酚峰形较好,阴性对照品溶液在大黄素、大黄酚保留时间的位置上无干扰。见图1。