慈菇消脂丸中大黄素和大黄酚含量的测定

　　2.5  线性关系考察

    精密吸取含大黄素对照品、大黄酚对照品均为12.50、18.75、25.00、31.25、37.50 μg/mL的对照品系列溶液20.0 μL进样,测定积分面积。以色谱峰面积A和进样浓度C(μg/mL)绘制标准曲线,得回归方程分别为：Y＝2 121.2X－4 319,r2＝0.999 3；Y＝1 349.9X＋8 876,r2＝0.999 5。表明大黄素、大黄酚在0.25～0.75 μg范围内与峰面积呈良好线性关系。

　　2.6  精密度试验

    精密量取同一对照品溶液10 μL进样,重复5次,测定大黄素、大黄酚的峰面积积分值。结果平均峰面积分别为48 521±415、42 574±1 313,RSD分别为0.86%、3.09%。表明本法精密度良好。

　　2.7  稳定性试验

    精密量取同一供试品溶液20 μL,分别于第1、2、3日各重复进样5次,并测定大黄素、大黄酚峰面积积分值。结果大黄素RSD分别为0.855%、0.105%、0.107%,总RSD＝0.475%；大黄酚RSD分别为2.679%、0.437%、0.790%,总RSD＝1.785%。说明供试品溶液在72 h内基本稳定。

　　2.8  加样回收率试验

    精密称取已知大黄素(0.37 mg/g)、大黄酚(0.21 mg/g)含量的慈菇消脂丸约100 mg,共6份,精密称定,分别加入大黄素对照品37.5 μg,大黄酚对照品20.3 μg,按照“2.3”项下方法制备供试品溶液,按照“2.5”项下方法进样20.0 μL,测定积分面积,并根据标准曲线计算供试品中大黄素、大黄酚含量及相应的回收率。结果见表1。 表1  加样回收率试验结果(略)

　　2.9  含量测定
  
　　取不同批号慈菇消脂丸6份,各30粒,研匀,精密称重200 mg于10 mL量瓶中,按“2.3”项下方法制备供试品溶液,按“2.5”项下方法进样20.0 μL,测定积分面积,并根据标准曲线计算供试品中大黄素、大黄酚含量。结果见表2。表2  慈菇消脂丸中大黄素、大黄酚含量测定结果(略)

　　3  讨论

    本试验以大黄素及大黄酚的含量为指标,考察了不同加热温度(50、70、100 ℃)及加热时间(15、30、60 min)的提取效果,结果表明,水浴70 ℃,加热时间为30、60 min时,大黄素及大黄酚的含量较高。考虑节约资源和时间,最后确定供试品溶液以70 ℃水浴上加热30 min提取。
   
　　大黄素、大黄酚为决明子、何首乌中蒽醌类化合物的代表,蒽醌类化合物具有良好的消脂化瘀之功效,建立慈菇消脂丸中的大黄素及大黄酚含量的HPLC测定法是必要的,也是可行的。本研究参照2005年版《中华人民共和国药典》(一部)[2]初步建立了慈菇消脂丸中大黄素及大黄酚含量的HPLC测定法,方法稳定、简便易行,为制剂的生产质量和临床应用提供了依据和保障。

【参考文献】
  　[1] 谢亮亮,王英锋,刘锁兰,等.HPLC法测定六味安消片中大黄素和大黄酚的含量[J].药物分析杂志,2007,27(7)：1096.

　　[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.17.