川白芷提取物异欧前胡素大鼠体内药动学研究

　　1.2  动物

　　Wistar雌性大鼠12只,体重(200±20)g,购于成都中医药大学动物中心(动管号：川实动管质第8号)。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    色谱柱：Agilent E clipse XDB-C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)；柱温：室温；流动相：甲醇-水＝65∶35；流速：1.0 mL/min, 检测波长310 nm。

　　2.2  标准液的配制

    精密称取异欧前胡素对照品3.98 mg,用甲醇溶解并定容于50 mL容量瓶中作为对照品储备液,置于冰箱中保存备用。

　　2.3  供试品溶液的配制

    川白芷药材由醇提、柱色谱分离制备并多次重结晶,得针状结晶体；经四川大学华西药学院测试分析中心核磁共振检测,确认为异欧前胡素单体。

    精密称取100 mg样品,用吐温-80乳化并定容于25 mL容量瓶中备用。

　　2.4  给药采血及样品处理

    大鼠禁食不禁水12 h,80 mg/kg灌胃给药后,分别于0.3、0.5、1、1.2、1.6、1.8、2、3、4、6、8、24 h时间点,大鼠眼眶取血0.5 mL,肝素抗凝。每管血中加入MTBE 2 mL,振荡5 min, 3 000 r/min离心10 min。置于超低温冰箱中冷冻至下层冰冻后,倾出取上清液并挥干,用20 μL甲醇溶解残留物进行检测。记录色谱峰面积,以外标法定量。

　　2.5  专属性考察

　　按前述方法操作,在相同的实验条件下,血浆中杂质不干扰异欧前胡素的测定。异欧前胡素保留时间为13.48 min。见图1。

　　2.6  线性范围及最小可定量浓度

    用空白血样将对照品溶液分别稀释成浓度为15.92、7.96、3.98、1.99、0.995 mg/L样品,按“2.4”项下方法操作并测定。以峰面积对浓度进行线性回归,得回归方程：Y＝0.027X－0.245 4,R＝0.998,样品在0.995～15.92 mg/L内线性关系良好,定量检测下限为0.995 mg/L。

　　2.7  回收率及精密度试验

    取空白血样,按“2.6”项下方法制备低、中、高3个浓度(2、6、10 mg/L)的质量控制样品,每一浓度平行操作3份,代入线性方程计算浓度,以测定值与加入的比值计算回收率,并计算日内精密度。连续3 d配制并测定上述浓度样品,考察方法日间精密度。见表1。表1  回收率测定结果(略)

　　2.8  药物动力学测定

　　经灌胃给药后,大鼠体内异欧前胡素平均血药浓度-时间曲线见图2。数据采用DAS2.0软件处理,主要药动学参数见表2。表2  异欧前胡素主要药动学参数(略)

　　3  讨论

    本研究结果表明,异欧前胡素在大鼠体内呈二室开放模型,其血药浓度在1.6 h达到峰值,与文献[2]报道相近；主要药动学参数表明,异欧前胡素与白芷中其他香豆类成分相似[3],吸收迅速,消除较快。另外,用MTBE处理含药血样,具有安全低毒、干扰小的优点。MTBE熔点低,冷冻后分离完全；MTBE沸点低,易于挥干,因而操作简便。

【参考文献】
  　　[1] 龚志南.中药白芷乳剂大鼠鼻腔给药的体内研究[J].中国临床药学杂志,2001,10(6)：370.

　　[2] 潘龙刚.白芷光敏胶囊加黑光治疗银屑病的研究[J].中成药研究,1983, (3)：30.

　　[3] 黄玉伟,陈晓辉,霍艳双,等.白芷提取物欧前胡素在大鼠体内的药物动力学[J].沈阳药科大学学报,2008,25(3)：215－218.