高效液相色谱法测定肾炎解热片中连翘苷的含量

                  作者：方晓明,曹爱民,包永睿

【摘要】  目的 建立肾炎解热片中连翘苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法,以shim-pak clc-ODS (4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.025 mol/L磷酸水(20∶80)为流动相,流速1 mL/min,检测波长277 nm。结果 连翘苷进样量在0.12～0.5 μg范围内线性关系良好,平均回收率为97.1%(n＝5),RSD＝1.61%。结论 本试验含量测定方法可作为该制剂质量控制方法。

【关键词】  肾炎解热片；连翘苷；高效液相色谱法；含量测定
   
　　Abstract：Objective To establish a method for the determination of Forsythin in Shenyan Jiere Tablets by HPLC. Methods The separation was performed on shim-pak clc-ODS (4.6 mm×150 mm, 5 μm) with Accetonitrile-0.025 mol/L H3PO4 (20∶80) as mobile phase. The flow rate was 1 mL/min and UV detector was at 277 nm. Results The method had good average recovery with 97.1% (n＝5), RSD＝1.6%, good linear relationship within the range of 0.12～0.5 μg. Conclusion The method is accurate, reliable and can be used for quality control of the production.

    Key words：Shenyan Jiere Tablets；Forsythin；HPLC；content determination
 
    肾炎解热片由白茅根、连翘等14味中药组成,具有疏解风热、宣肺利水功能,用于急性肺炎的热重寒轻、头面眼睑浮肿等症的治疗。本试验采用高效液相色谱(HPLC)法对该制剂连翘中的连翘苷含量加以测定,经方法学考察,方法专属性、精密度、重复性、回收率试验均符合有关规定,为该制剂质量分析建立了可靠的控制方法。

　　1  仪器与试药

    岛津LC-10A液相色谱仪,浙江大学N3000工作站；DL-360超声波仪,360 W,35 kHz(浙江象山县石浦海天电子仪器厂)。
   
　　连翘苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号110842-200403)；肾炎解热片由辽宁桓仁药业提供。甲醇为色谱纯(天津科密欧公司)。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    以shim-pak clc-ODS(4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱；以乙腈-0.025 mol/L磷酸水(20∶80)为流动相,流速1 mL/min；检测波长277 nm。

　　2.2  对照品溶液的制备

    精密称取连翘苷对照品适量,加甲醇溶解制成每1 mL含40 μg的溶液,作为对照品溶液。

　　2.3  供试品溶液的制备

    取本品20片研细,取粉末约0.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50 mL,密塞,称定重量,超声处理25 min,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密吸取续滤液25 mL,蒸至近干,用中性氧化铝2 g拌匀,加于中性氧化铝柱(100～120目,5 g,内径1～1.5 cm)上,用70%乙醇100 mL洗脱。收集洗脱液,浓缩至近干,残渣用甲醇20 mL溶解后转移至25 mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,即得。

　　2.4  阴性样品溶液的制备

    按处方去除连翘,其他药味不变,按“2.3”项下方法制备阴性样品溶液。

　　2.5  方法专属性考察

    精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10 μL,注入液相色谱仪中。测定结果提示,供试品具有与对照品相同保留时间色谱峰,阴性样品无干扰,方法专属性良好。见图1。