高效液相色谱法测定复方茶碱麻黄碱片中可可碱的含量

　　2.6  精密度试验

    精密量取“2.2”项下的可可碱对照品溶液适量,加流动相制成每1 mL含可可碱25 μg的溶液,重复进样6次,分别记录峰面积,其峰面积的RSD＝0.1%。

　　2.7  稳定性试验

    精密量取同一供试品溶液20 μL,按0、4、8、12、24 h间隔进样,测得可可碱色谱峰面积的RSD＝0.07%。结果表明,供试品溶液在室温条件下,24 h内稳定。

　　2.8  重复性试验

    取同一供试品,按“2.3”项下的方法平行制备5份供试品溶液并测定,含量为标示量的均值分别为100.1%、99.8%、99.3%、100.0%、101.0%,RSD分别为0.4%、0.6%、1.0%、0.5%、0.8%。

　　2.9  加样回收率试验

    精密称取已知可可碱含量的供试品0.229 2 g,置于100 mL量瓶中,加流动相超声溶解并稀释至刻度,滤过,分别精取续滤液3.5 mL置25 mL量瓶中,共取9份,平均分成3组,分别向每组精密加入“2.2”项下的可可碱对照品溶液适量,使样品溶液中每1 mL含可可碱20、25、30 μg,按“2.1”项下的色谱条件测定。记录峰面积,按外标法计算出可可碱的平均回收率为100.49%(n＝9),RSD＝1.1%。见表1。表1  加样回收率试验结果(略)
 
　　2.10  专属性试验

    分别精密量取供试品溶液、对照品溶液和空白样品溶液各20 μL,分别注入高效液相色谱仪,测定。结果在空白样品色谱图中,在与可可碱对照溶液峰相同的保留时间处无吸收峰。见图1。

　　2.11  样品测定
   
　　精取对照品溶液(25 μg/mL)和供试品溶液各20 μL,注入高效液相色谱仪中,记录色谱图,测定并计算3批样品的含量,结果见表2。表2  含量测定结果(略)

　　3  讨论

    对于供试品的溶剂、流动相、检测波长及柱温的选择,参考复方妥英麻黄茶碱片标准项下规定的条件[2],并对流动相比例、柱温、流速分别进行了优选。如果流动相的比例为77.5∶22.5∶0.2,分离效果不好；如果流动相的比例为76∶24∶0.2,则基线下沉。最后采取0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇-三乙胺(77∶23∶0.2)流动相系统、柱温45 ℃、流速为0.8 mL/min时,与其他组分分离效果最好。流动相作为溶剂,需在超声条件下进行溶解。本试验结果表明,本法建立的复方茶碱麻黄碱片中可可碱的含量测定方法,可用于复方茶碱麻黄碱片的质量控制方法。

【参考文献】
  　　[1] 国家食品药品监督管理局.国家药品标准(化学药品地方标准上升国家标准)[S].第十四册.2003.100.

　　[2] 国家食品药品监督管理局.国家药品标准(化学药品地方标准上升国家标准)[S].第十一册.2002.263.