紫英颗粒对慢性盆腔炎常见致病菌抑菌作用的研究

 
　　3.2  体外抑菌作用

　　3.2.1  最低抑菌浓度和最低杀菌浓度测定 

　　参照文献[2]方法。采用试管内药物溶液稀释法分别进行9个临床菌株的最低抑菌浓度(MIC)测定,以各菌种的标准菌作为质控菌株。试验中每株取灭菌试管10支,分别加入以紫英颗粒、氧氟沙星、甲硝唑和氟康唑配制的9种系列药物浓度的培养基1.0 mL。第10管加纯培养基1 mL。除第10管为阴性对照管不加菌液外,其余9管均加入含细菌约1×103个的相应菌液0.1 mL。摇匀后将试管置37 ℃恒温培养箱中培养孵育。培养方法及时间同平板抑菌环试验。试验结束后观察记录结果,肉眼观察有无细菌生长。培养基澄清,表示无细菌生长；培养基混浊,表示有细菌生长。无菌生长的药物最高稀释度即为该药的MIC。
   
　　从上述无菌生长的试管中用接种环转接种于相应的平板培养基上,再作相应培养。平皿上菌落数＜5个的最小稀释度的药物浓度即为该药的最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,紫英颗粒对临床分离的9种慢性盆腔炎常见致病菌均有良好的抑菌作用。对粪肠球菌和乙型溶血性链球菌的敏感性最好；对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和脆弱类的敏感性次之。详见表3。表3  紫英颗粒体外抑菌浓度测定结果(略)

　　3.2.2  平板抑菌环试验 

　　参照文献[1]方法。取对数生长期的9种细菌,稀释至含细菌数9×106/mL个,分别用棉签取菌液,均匀涂布于相应固体培养基的无菌琼脂平板表面。每个平板用直径6 mm的打孔器打孔3个。每个菌种的平板分为2组。其中1组每孔用微量加样器加入含原药材2 g/mL的紫英颗粒药液50 μL；另一组加入同体积的相应阳性对照药。阳性对照药：脆弱类杆菌用0.5%甲硝唑,其余均用0.2%氧氟沙星。然后将平板置37 ℃恒温培养箱中培养孵育。脆弱类杆菌厌氧培养48 h,乙型溶血性链球菌常规培养24 h,其他菌常规培养9 h。取平板观察药物抑菌环直径。结果表明,紫英颗粒浓度对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、乙型溶血性链球菌和铜绿色假单胞菌均有较强的抑制作用,尤其是对脆弱类杆菌有较明显的抑制作用。按照药物敏感性评定标准,均达到了中度以上敏感。结果见表4。表4  紫英颗粒平板抑菌环试验结果(略)

　　4  讨论
   
　　慢性盆腔炎的西药治疗主要以抑菌消炎、改善病灶周围血氧供应和增强机体免疫力为主。抗菌治疗是目前最主要的方法。紫英颗粒对9种临床分离致病菌进行的抑菌试验结果表明,该药具有较广谱的抑菌作用。不同细菌对药物的敏感性依次为：粪肠球菌＞乙型溶血性链球菌＞大肠埃希菌＞金黄色葡萄球菌＞脆弱类杆菌＞变形杆菌＞表皮葡萄球菌＞肺炎克雷伯菌＞铜绿色假单胞菌。结果还显示,紫英颗粒对同一菌种不同菌株的MIC、MBC差异较小,提示紫英颗粒对细菌有较稳定的抑制作用,这将有助于临床中出现耐药菌株患者的治疗。体内试验也显示紫英颗粒有较好的抑菌作用,口服能明显提高大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染小鼠的存活率。有研究也表明,紫花地丁、蒲公英等均有较广谱的抑菌作用[2-3]。本研究结果为紫英颗粒临床应用提供了试验依据。

【参考文献】
  　[1] 李定刚,张武岗,宋毓民,等.紫花地丁抗菌活性成分研究[J].西北农林科技大学学报,2006,34(4)：87－89.

　　[2] 李仪奎.中药药理实验方法学[M].第2版.上海：上海科技出版社,2006. 755－756,758.

　　[3] 童延清,李 晖.紫花地丁、蒲公英体外抗菌作用研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2003,23(9)：669.